[发明专利]外显子人源化小鼠

权利要求书

1.一种供体载体，其包含：在由包含于小鼠的基因组的n个外显子构成的靶基因的包含该n个外显子的片段中，所述n个外显子分别被置换为所对应的人靶基因的外显子的片段。

2.根据权利要求1所述的供体载体，其中，靶基因为甲状腺素运载蛋白基因。

3.一种载体，其为表达用于在紧靠第1外显子的上游切断基因组的引导RNA的载体，所述载体包含编码待切断的靶序列、tracrRNA和DNA切割酶的DNA。

4.一种载体，其为表达用于在紧靠第n外显子的下游切断基因组的引导RNA的载体，所述载体包含编码待切断的靶序列、tracrRNA和DNA切割酶的DNA。

5.一种外显子人源化ES细胞，其中，通过将权利要求1或2所述的供体载体、以及权利要求3和4所述的载体导入ES细胞中，从而使内含子部分为小鼠基因的碱基序列、外显子部分被人基因的碱基序列置换。

6.一种外显子人源化小鼠，其使用权利要求5所述的ES细胞而制作。

7.一种小鼠基因的外显子被人基因的外显子置换了的、外显子人源化小鼠的制作方法，其包括以下的工序：

(a)将权利要求1或2所述的供体载体、以及权利要求3和4所述的载体导入ES细胞的工序、

(b)由工序(a)中得到的ES细胞制作嵌合体胚胎，将该嵌合体胚胎移植到养母中，由此制作嵌合小鼠的工序、以及

(c)使工序(b)中得到的嵌合小鼠中的雄性小鼠与雌性小鼠交配，产下子代小鼠的工序。

8.一种制作疾病模型小鼠的方法，其特征在于，将与疾病相关的基因突变导入权利要求6所述的外显子人源化小鼠的外显子中。

9.一种基因治疗用实验动物，其包括：权利要求6所述的外显子人源化小鼠、或利用权利要求8所述的方法制作的疾病模型小鼠。