[发明专利]衔接分子、该衔接分子与生物分子结合的生物分子-衔接分子复合体、生物分子分析装置及生物分子分析方法在审
申请号: | 201980100366.7 | 申请日: | 2019-09-18 |
公开(公告)号: | CN114402073A | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 藤冈满;后藤佑介;赤堀玲奈 | 申请(专利权)人: | 株式会社日立高新技术 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12M1/00;C12Q1/6869;C12Q1/6876 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人: | 陈彦;宋海花 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 衔接 分子 生物 结合 复合体 分析 装置 方法 | ||
1.一种衔接分子,其具备:
双链核酸区域,其具有与解析对象的生物分子直接或间接地结合的一方端部,且由彼此互补的碱基序列形成;
一对单链核酸区域,其连接于所述双链核酸区域中与所述一方端部不同的另一方端部,且由彼此不互补的碱基序列形成;以及
嵌段分子,其配置于所述一对单链核酸区域中一方的单链核酸区域,且直径大于所述生物分子的解析装置中的纳米孔的直径。
2.根据权利要求1所述的衔接分子,其特征在于,
所述嵌段分子配置于所述一对单链核酸区域中端部为3’末端的单链核酸区域。
3.根据权利要求1所述的衔接分子,其特征在于,
所述嵌段分子为能够与所述单链核酸区域结合的分子或由所述单链核酸区域内的互补区域所形成的发夹结构。
4.根据权利要求1所述的衔接分子,其特征在于,
所述一对单链核酸区域中,端部为3’末端的单链核酸区域具备能够与分子发动机结合的分子发动机结合部。
5.根据权利要求4所述的衔接分子,其特征在于,
具备所述分子发动机结合部的单链核酸区域在与该分子发动机结合部相比靠3’末端侧具备能够与引物杂交的引物结合部。
6.根据权利要求5所述的衔接分子,其特征在于,
在所述分子发动机结合部与所述引物结合部之间,具有所述分子发动机不能结合的间隔区。
7.根据权利要求1所述的衔接分子,其特征在于,
所述一对单链核酸区域中,端部为5’末端的单链核酸区域中,从5’末端直至至少第2位的碱基由胸腺嘧啶形成。
8.根据权利要求1所述的衔接分子,其特征在于,
所述双链核酸区域具有标记序列。
9.一种生物体-衔接分子复合体,其包含解析对象的生物分子、以及与该生物分子的两末端直接或间接地结合的权利要求1~8中任一项所述的衔接分子。
10.根据权利要求9所述的生物体-衔接分子复合体,其特征在于,
所述解析对象的生物分子为双链核酸。
11.一种生物体分析装置,其具备:
具有纳米孔的薄膜;
隔着所述薄膜对置的第1液槽和第2液槽;
以在所述第1液槽中填充有包含权利要求9或10所述的生物体-衔接分子复合体的电解质溶液,并且在所述第2液槽中填充有电解质溶液的状态,对于第1液槽与第2液槽之间施加电压的电压源;以及
以在所述第1液槽与所述第2液槽之间形成所期望的电位梯度的方式控制所述电压源的控制装置。
12.一种生物分子的分析方法,其特征在于,具备下述工序:
以在隔着具有纳米孔的薄膜对置的第1液槽和第2液槽中,在第1液槽内填充有包含权利要求9或10所述的生物体-衔接分子复合体的电解质溶液,且在第2液槽内填充有电解质溶液的状态,对于第1液槽与第2液槽之间施加电压,形成使第1液槽侧为负或接地电位、使第2液槽为正电位的电位梯度的工序;以及
测定所述生物体-衔接分子复合体从所述第2液槽朝向所述第1液槽通过所述纳米孔时产生的信号的工序,
在形成所述电位梯度的工序中,生物体-衔接分子复合体中的单链核酸区域介由所述纳米孔导入至所述第2液槽内,通过电位梯度,所述生物体-衔接分子复合体从所述第1液槽朝向所述第2液槽进行移动。
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