[发明专利]一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系

说明书

本发明属于制药工程领域，具体涉及一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系。本发明公开了一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系，构建方法为，将一端为脂链的靶向配体修饰到载药牛奶外泌体表面，所述靶向配体另一端为可特异性结合肿瘤细胞表面过表达的受体的分子。本发明中被修饰的载药牛奶外泌体可以靶向结合癌细胞，从而增强被癌细胞的摄取，达到特异杀伤肿瘤细胞的效果。

技术领域

本发明属于制药工程领域，具体涉及一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系。

背景技术

外泌体是由细胞分泌的天然纳米级别囊泡，可以起到细胞间通讯的作用，其中空的结构以及良好的生物相容性使得外泌体被广泛用于纳米载药体系。由于细胞培养带来的复杂操作及高成本，限制了外泌体的大批量生产。研究表明，提取牛奶中的外泌体可以解决这一问题，甚至由于牛奶外泌体对胃肠环境的耐受性，使得其具备口服递药的潜力。

载药体系的靶向修饰通常选用可与肿瘤细胞表面过表达受体进行特异性结合的分子，将其锚定在载药体系表面，达到将药物靶向递送至肿瘤的效果。

因此，靶向修饰牛奶外泌体对建立纳米载药体系具有重要意义。

发明内容

基于上述问题，本发明提供了一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系，所述靶向载药系包括疏水性药物，所述疏水性药物被牛奶外泌体装载，所述牛奶外泌体外部连接有靶向配体，所述靶向配体具有脂链端和靶向端。

在一种实施例中，所述靶向配体的脂链端包括二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、大豆磷脂酰胆碱(SPC)；

所述靶向配体的靶向端包括叶酸(FA)、透明质酸(HA)、核酸适配体AS1411。

在一种实施例中，所述靶向配体脂链端和靶向端通过聚乙二醇(PEG₂₀₀₀)连接。

在一种实施例中，所述靶向配体通过酰胺缩合反应所制得。

在一种实施例中，所述疏水性药物包括化学药物、基因药物。

所述化学药物包括广谱抗癌药；基因药物包括肿瘤生长抑制基因。

在一种实施例中，所述化学药物包括阿霉素；所述基因药物包括miRNA-204。

本发明的另一个目的在于，提供一种于牛奶外泌体的靶向载药体系的制备方法，制备方法包括：

S1，靶向配体的制备；

S2，牛奶外泌体装载疏水性药物，得到载药牛奶外泌体；

S3，将S2中的载药牛奶外泌体装载靶向配体，得到所述基于牛奶外泌体的靶向载药体系。

在一种实施例中，S2、S3中所述装载的方法为孵育。

在一种实施例中，所述牛奶外泌体的制备方法：通过2～4M的盐酸调节牛奶的pH值为4.55～4.64，用离心力为0.7×10⁴～1.0×10⁴g进行离心去除杂蛋白后，用离心力为11.0×10⁴～13.5×10⁴g进行离心富集牛奶外泌体。

在一种实施例中，所述S1制备的靶向配体是通过酰胺缩合反应得到，并且通过LH20柱分离纯化。

有益效果

与现有研究相比，本发明通过具有脂链端和靶向端的靶向配体修饰到载药牛奶外泌体表面，提供了一种基于牛奶外泌体的靶向载药体系及其制备方法，可以增强对肿瘤细胞的结合亲和力，实现药物在肿瘤细胞中的有效积累。本发明所构建的牛奶外泌体靶向载药体系，与普通载药体系相比具有更高的生物相容性，有望增强牛奶外泌体口服给药的药效，可以促进牛奶外泌体这一天然易得的纳米载体在肿瘤靶向治疗中的应用。