[发明专利]一种3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物及其提取方法和应用

权利要求书

1.一种3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物，结构式如式(1)-式(4)所示：

2.一种权利要求1所述的3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

S1、将青钱柳叶用70％乙醇/水加热回流提取，浓缩得浸膏；

S2、将浸膏用水分散，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取，并将萃取液浓缩，分别得二氯甲烷萃取浓缩液、乙酸乙酯萃取浓缩液、正丁醇萃取浓缩液和水萃取浓缩液；

S3、采用HPLC-DAD、TLC和UPLC-MS/MS方法对二氯甲烷萃取浓缩液进行追踪、分析及分离纯化。

二氯甲烷部位经硅胶柱层析CH₂Cl₂:CH₃OH(100:1-0:100)梯度洗脱，10％EtOH-H₂SO₄对TLC斑点进行显色，不同波段的紫外灯下观察及HPLC-DAD对样品进行分析，浓缩合并得到9个部位(A-I)。A-I部位TLC薄层分析，10％浓硫酸/乙醇加热显色，其中Fr.I薄层板显示紫红色条带，HPLC-DAD分析主要为末端吸收，初步确定I部位为三萜类富集部位。首先对FrI采用聚酰胺柱色谱，去除色素，鞣质等干扰性成分。接着采用硅胶柱层析、小孔树脂柱层析和反向ODS柱层析，整个分离过程用UPLC-MS/MS方法对三萜进行追踪，10％EtOH-H₂SO₄对TLC斑点进行显色及HPLC-DAD对样品进行分析，从而对3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物进行有效分离。最后采用半制备高效液相对目标化合物进行纯化。

3.如权利要求2所述的3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物的提取方法，其特征在于：S1中，青钱柳叶经过干燥粉碎处理。

4.如权利要求2所述的3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物的提取方法，其特征在于：S1中，采用乙醇的浓度为70％，青钱柳叶质量与乙醇的比值为1:10，加热的温度为120℃，加热的时间为2h，浓缩的温度为60℃，浓缩的时间为2-3天。

5.如权利要求2所述的3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物的提取方法，其特征在于：S2中，利用二氯甲烷萃取三次，青钱柳叶质量与每次使用的二氯甲烷体积的比值为1:10，青钱柳叶质量与每次使用的正丁醇体积的比值为1:10，浓缩的温度为60℃，浓缩的时间为24-48小时。

6.一种权利要求1所述的3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物在制备治疗糖尿病、高血脂、高血压、关节痛、神经衰弱的药物中的应用。

7.一种治疗糖尿病的药物，含权利要求1所述的至少一种3,4-裂环达玛烷型四环三萜化合物或其药学上可用的盐。