[发明专利]一种DNA纳米线放大的共敏光电检测平台及其制法和应用

权利要求书

1.一种基于DNA纳米线放大的光致电共敏生物传感平台的检测应用，其特征是：利用具有光电活性的Bi₂O₃-ZnO材料及敏化剂CdS QDs形成共敏结构，结合Exo III辅助多重放大技术，通过构建DNA纳米线，制备了一种方便、实用的光致电化学传感平台，实现了对凝血酶的超灵敏检测；目标凝血酶引发Exo III辅助多重放大反应，释放大量DNA a1；同时，两条单链DNA通过错位杂交形成可以标记敏化剂CdS QDs的DNA纳米线；利用a1做桥梁，敏化剂CdSQDs与基底材料Bi₂O₃-ZnO构成共敏结构，实现了凝血酶的超灵敏检测；

其特征方法由下列步骤组成：

步骤1.Exo III辅助多重放大过程：将10μL 20μM凝血酶适体和10μL 20μM触发器放在离心管中并加热至90℃保持5分钟，自然冷却获得拱形结构；将2μL不同浓度凝血酶溶液加入到含有2μL拱形结构溶液，16μL 10μM HP和10U Exo III的离心管中在37℃下孵育2小时，释放出大量a1链；

步骤2.CdS QDs标记的纳米线过程：将60μL 1μM DNA1和60μL 1μM DNA2混合溶液95℃下加热5分钟，自然冷却形成DNA纳米线b溶液 ；然后，将100μL活化好的CdS量子点和20μL10μM DNA3混合溶液中在37℃下反应6小时，低速离心1分钟；将所得到的沉淀和上述纳米线b溶液混合，在37℃下反应2小时，获得CdS QDs标记的纳米线结构c；

步骤3.PEC传感平台的制备和检测应用：将10μL 15mg/ mLBi₂O₃-ZnO悬浮液滴在ITO电极上；然后，将10μL 10μM cDNA溶液滴在纳米复合材料上，在37℃下反应6小时；同时，上述30μL CdS QDs标记的纳米线结构 c和a1链在37℃下孵育2小时；紧接着，将10μL上述溶液加入到修饰好的电极上孵育2小时，使a1链另一端与cDNA杂交；最后，将修饰好的电极用TE缓冲液洗涤以除去未杂交的DNA链并在空气中干燥，测量PEC信号。