[发明专利]一种通过改变表观遗传修饰水平抵御MLL白血病的小鼠模型及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 202010008036.X | 申请日： | 2020-01-03 |
| 公开（公告）号： | CN111109200A | 公开（公告）日： | 2020-05-08 |
| 发明（设计）人： | 初雅婧;袁卫平;汪晓敏;李孟柯 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所） |
| 主分类号： | A01K67/027 | 分类号： | A01K67/027;C12N15/867;C12N15/54 |
| 代理公司： | 天津市尚仪知识产权代理事务所(普通合伙) 12217 | 代理人： | 王山 |
| 地址： | 300041 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通过 改变 表观 遗传 修饰 水平 抵御 mll 白血病 小鼠 模型 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种通过改变表观遗传修饰水平抵御MLL白血病的小鼠模型，其特征在于：所述小鼠具有上调的蛋白H3第9位赖氨酸三甲基化修饰水平。
2.一种通过改变表观遗传修饰水平抵御MLL白血病的小鼠模型在对MLL白血病的潜在药物进行定性和/或定量评价中的用途。
3.一种通过改变表观遗传修饰水平抵御MLL白血病的小鼠模型的构建方法，其特征在于：利用慢病毒介导的基因导入技术，将上调H3K9me3水平的组蛋白赖氨酸甲基转移酶Suv39h1基因导入MLL白血病细胞中，通过移植给经半致死剂量照射的受体小鼠，获得抵御MLL白血病的小鼠模型。
4.根据权利要求3所述的一种通过改变表观遗传修饰水平抵御MLL白血病的小鼠模型的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
a. MLL-AF9白血病小鼠的构建
Ⅰ.富集小鼠骨髓c-Kit+细胞；
Ⅱ. 病毒感染富集的小鼠骨髓c-Kit+细胞；
b. 高表达Suv39h1基因载体的构建
Ⅰ.Suv39h1基因的扩增；
Ⅱ.酶切MSCV-IRES-EGFP Vector和PCR扩增产物SUV39H1
Ⅲ. 目的片段与载体进行连接；
Ⅳ. 连接产物转化大肠杆菌感受态，获得MSCV-mSUV39H1-IRES-GFP；
c. 包装病毒和浓缩
Ⅰ.病毒包装；
Ⅱ.病毒浓缩；
d.病毒感染获得表达Suv39h1的阳性MLL白血病细胞
Ⅰ.包装过表达Suv39h1的病毒；
Ⅱ.病毒感染收集的MLL-AF9的白血病细胞；
e. 将感染了Suv39h1的白血病细胞移植亚致死剂量照射小鼠，获得抵御MLL白血病小鼠模型。
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