[发明专利]一种细胞程序性死亡受体1抗体制剂及其用途

说明书

本发明提供了一种包含抗细胞程序性死亡受体1单克隆抗体的药物制剂，所述药物配制剂包括：抗PD‑1单克隆抗体、枸橼酸‑枸橼酸钠缓冲液、蛋白保护剂和、表面活性剂、等渗调节剂等成分。本品经过40℃，最长4周的加速实验，主要检测指标外观、浓度、浊度（A350）、pH值、渗透压、纯度等测试等标均无明显变化，表现出良好的稳定性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种PD-1抗体制剂及其用途。

背景技术

细胞程序性死亡受体1(programmed death 1，PD-1)，也称CD279，是一种重要的免疫抑制分子，属于免疫球蛋白超家族CD28家族成员，分子量为50～55kD的I型跨膜糖蛋白。PD-1持续性表达在T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、单核细胞以及骨髓细胞的表面。PD-1具有两个已知配体，PD-L1和PD-L2。目前，研究发现，PD-1与其配体PD-L1结合，可以传导抑制性的信号，减低淋巴结CD8+T细胞的增生，而且PD-1还可以借由调节Bcl-2基因，控制淋巴结中抗原特异性T细胞的聚积。而阻断PD-1与PD-L1的结合，可以有效阻止T淋巴细胞抑制信号的产生，从而打破免疫系统对自身组织的外周免疫耐受，促进T淋巴细胞的活化与增殖，以及细胞因子表达。因此研发新型的抗PD-1单克隆抗体，用于癌症的免疫治疗，使其具有更低的毒副作用，更佳的临床药效，成为目前的研究热点，也将给患者提供更多的药物选择。

蛋白质(单克隆抗体等)类药物制剂适合于非肠道给药，包括静脉内、肌肉内、腹膜内或皮下注射等给药方式。其液体制剂使用方便，但稳定性较差，对储存条件要求较高，一般需在低温条件下保存。此外液体制剂中蛋白易形成聚体或颗粒，也会导致单抗制剂稳定性下降。通常的药物制剂中，包含的蛋白质特别是单克隆抗体类药物，很难在储藏期内，尤其非冷藏条件下保持良好的物理稳定性、化学稳定性和生物稳定性，因此需要研究针对此类药物的稳定缓冲液体系。已有报道可在蛋白（单抗）类药物中加入的稳定剂包括表面活性剂、糖和多元醇、盐类、氨基酸/氨基酸盐以及一些大分子化合物。但是抗体类药物的结构性质各异且易于聚合，目前还缺乏满足制药工业需求的稳定的蛋白制剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种包含抗PD-1单克隆抗体的药物制剂。

本发明通过筛选和配方优化研究，首先确定使用枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液作为抗PD-1单抗药物制剂的优选缓冲体系。具体地该药物制剂包括抗PD-1单克隆抗体、缓冲液、稳定剂和表面活性剂、以及可选地包含等渗调节剂等成分。

在经筛选的缓冲液体系基础上，设计单因素试验，考察蛋白质浓度、pH值以及稳定剂种类及含量、表面活性剂种类及含量、是否添加等渗调节剂等因素对蛋白稳定性的影响。从而优化筛选得出优选的其他制剂组分。

所述药物制剂中抗PD-1单克隆抗体的含量较佳地为5-50 mg/mL，更佳地为8-30mg/mL，优选地为10.0mg/mL，所述抗PD-1单克隆抗体可选地为具有SEQ ID NO.7所示的重链可变区和SEQ ID NO.8所示的轻链可变区，优选h1G4抗体（由SEQ ID NO.10所示的重链和SEQ ID NO.9所示的轻链构成）。

该制剂的缓冲液体系中，所述枸橼酸-枸橼酸钠的浓度较佳地为10-50mM，更佳地为15-30mM，优选地为20mM；所述药物制剂的pH值较佳地为：pH 5.0-6.5，优选地为：pH 5.5。

本发明制剂还添加蛋白保护剂提供产品的稳定性，选自本领域常规蛋白保护剂，所述蛋白保护剂能够保护蛋白质药物的稳定性，并保护蛋白质药物的功能不受条件变化的影响(例如：冷冻、冻干或其他制备条件的变化)。蛋白保护剂较佳地包括：糖类、蛋白质、氨基酸、聚合物、盐、胺、表面活性剂等，更佳地包括：蔗糖、甘露醇、或甘氨酸中的一种或多种。所述蛋白保护剂的含量较佳地为：蔗糖、甘氨酸或甘露醇的一种或数种，质量/体积百分含量（g/L）0.5-5%；较佳地为：1-3%蔗糖，或者1%甘氨酸；优选地为：3%甘露醇。