[发明专利]一种抑制病毒基因组RNA复制的多肽有效
| 申请号： | 202010008198.3 | 申请日： | 2020-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN111018955B | 公开（公告）日： | 2021-10-26 |
| 发明（设计）人： | 温康宁;董士尚;秦晓春;褚洪官;王昌辉 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C12N15/70;A61K38/16;A61P31/14 |
| 代理公司： | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人： | 薛鹏喜 |
| 地址： | 250022 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抑制 病毒 基因组 rna 复制 多肽 | ||
【权利要求书】：
1.多肽在制备抑制病毒性出血败血症病毒基因组RNA复制的药物中的应用；所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述多肽通过与病毒基因组RNA竞争NP上的结合位点来抑制病毒基因组RNA的复制。
2. 一种合成结合SEQ ID NO.1所示多肽的NP蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将SEQ ID NO.2所述的多核苷酸与NP基因通过SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.7所示的PCR引物自退火连接，并进一步PCR扩增，回收PCR产物；
（2）将步骤（1）回收的PCR产物连接到质粒载体上，得到重组质粒；然后将重组质粒转入大肠杆菌，得到阳性重组菌株；
（3）将阳性重组菌株振摇培养1-2 h，然后加入IPTG，使IPTG的终浓度为0.5 M，诱导培养16-18 h；将诱导培养后的菌体离心，沉淀用收菌buffer悬起，用高压匀质机破菌，破菌后进行离心，将离心分离后的上清与镍介质在4 ℃条件下进行孵育，然后依次进行洗杂、洗脱目的蛋白、浓缩和纯化处理，得到结合上述多肽的NP蛋白。
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