[发明专利]一种生成表面簇的方法

权利要求书

1.一种生成表面簇的方法，该方法包括：

通过第一通用引物和第二通用引物扩增靶序列，其中第一通用引物包括一个引发区段，并且第二通用引物包括引发区段、修饰基因区段和标记区段，以产生含有单链标记的PCR产物，其中PCR产物包含第一链和第二链，而第二链与单链标记相连；

提供基底，其中该基底包括探针、第一表面引物和第二表面引物；

应用PCR产物和引导到基底上，由此杂交PCR产物，引导和探针在基底表面上产生PCR产物/引导/探针复合物；

然后将PCR产物与探针连接，从而连接PCR产物；

冲洗基底，从而去除该PCR产物的第一链；以及

延伸第一表面引物和第二表面引物，最终形成表面簇，

所述引导是一段寡核苷酸序列，一部分序列与所述标记互补，一部分序列与探针互补，标记/引导对和探针/引导对在相应缓冲液中的熔化温度高于杂交和连接温度，并且探针/引导对的熔化温度高于标记/引导对的熔化温度。

2.如权利要求1所述的方法，其中探针、第一表面引物和第二表面引物都附着在基底上。

3.如权利要求2所述的方法，其中探针、第一表面引物和第二表面引物还包括间隔区，通过该间隔区，探针、第一表面引物、第二表面引物被连接到基底表面。

4.如权利要求1所述的方法，其中通用引物有尾区段和通用区段。