[发明专利]一种酶法生产D-泛酸的方法

权利要求书

1.一种产D-泛酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌表达泛酸合成酶。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，编码所述泛酸合成酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种高产D-泛酸的基因工程菌的构建方法，其特征在于，将如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码的基因连接到表达载体pET-28a(+)中得到重组质粒，将重组质粒转化到E.coliBL21(DE3)。

4.一种生产高酶活泛酸合成酶的方法，其特征在于，所述方法是以权利要求1所述重组菌为发酵菌株进行发酵产酶。

5.一种提高泛酸合成酶生产D-泛酸的方法，其特征在于，所述方法是将权利要求1所述重组菌添加至含有D-泛解酸和β-丙氨酸的反应液进行反应，得到D-泛酸发酵液。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法为：将所述重组菌按照体积比为10～15％的接种量接种于发酵培养基，通气量2.0～5.0vvm，温度28～35℃，搅拌速率400～700rpm；当培养基中葡萄糖浓度低于5～8g/L时，补料控制培养基中葡萄糖浓度为0.3～2g/L；当培养至OD₆₀₀在10～40时，加入IPTG、D-泛解酸和β-丙氨酸继续进行诱导培养，得到发酵液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵时间不低于50h，发酵过程中控制pH在6.0～8.0。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述IPTG、D-泛解酸和β-丙氨酸的终浓度分别为0.1～0.3g/L、30～70g/L和10～50g/L，诱导培养的温度30℃～40℃。

9.一种用于生产D-泛酸的催化剂，其特征在于，含有权利要求1所述重组菌。

10.权利要求1所述重组菌、权利要求4～8任一所述方法和权利要求9所述催化剂在制备D-泛酸中的应用。