[发明专利]一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗及其制备方法。该疫苗是针对国内水禽疫病中鸭呼肠孤病毒与鸭肝炎病毒混合感染的流行形势，提出了一个有效应对策略，即利用分离到的国内流行毒株鸭呼肠孤病毒17117株和鸭肝炎病毒1型16115株、3型16023株作为疫苗制备用毒株，经过抗原液制备、灭活、浓缩、按照一定比例混合制备而成，该疫苗的应用能做到一次免疫同时有效预防目前流行1型、3型鸭病毒性肝炎和鸭呼肠孤病毒病。

技术领域

本发明涉及一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗，属于兽用生物制品领域。

背景技术

鸭病毒性肝炎，是由鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV）引起雏鸭的一种以肝脏呈现出血性炎症为特征，具有急性、高度接触性和致死性的传染性疾病。该病一年四季均可发生，自然暴发时仅发生于雏鸭，对养殖业造成了巨大经济损失。传统的鸭肝炎病毒有三个血清型，分别引起1型、2型和3型鸭肝炎。近年来，由于免疫压力等因素，血清1型鸭肝炎病毒呈现出新的流行态势。禽呼肠孤病毒( Avian reovirus，ARV) 是呼肠孤病毒科、正呼肠孤病毒属中的一员，基因组为分节段双链 RNA，有10个节段，常见于鸡、火鸡、鸭、鹅及一些鸟类等宿主体内，以病毒性关节炎、肠道病、 腱鞘炎、矮小综合征、免疫抑制性疾病及吸收不良综合征等为临床特征。

发明内容

本发明目的是通过自行分离的一株新型鸭呼肠孤病毒和2株鸭肝炎病毒（血清1型和3型），提供一种可同时预防鸭呼肠孤病毒病和鸭病毒性肝炎的疫苗，一次免疫可预防两种疾病。

本发明的技术方案：

1. 本发明所述一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗，其特征与该疫苗中含有灭活的鸭呼肠孤病毒和血清1、3型鸭肝炎病毒；

所述的鸭呼肠孤病毒为鸭呼肠孤病毒17117株、血清1型鸭肝炎病毒为鸭肝炎病毒16115株和血清3型鸭肝炎病毒为鸭肝炎病毒16023株，以上三株病毒已于2019年12月27日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号分别为CGMCC No.18889、CGMCC No.18885和CGMCCNo.18973，保藏日期均为2019年12月27日。

2. 本发明所述一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗，其特征在于该疫苗的制备方法是用血清1型、3型鸭肝炎病毒接种鸭胚或鸡胚进行病毒繁殖，鸭呼肠孤病毒接种鸡胚或BHK细胞、Vero细胞、LMH细胞、DF-1细胞进行病毒繁殖，病毒液经灭活和浓缩；灭活和浓缩的血清1型鸭肝炎病毒、血清3型鸭肝炎病毒、鸭呼肠孤病毒液按1:1:1的体积比混合制备成水相，再按常规方法制备成灭活佐剂疫苗。

3. 本发明所述一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗，其特征在于该二联灭活疫苗抗原的质量标准为：血清1型鸭肝炎病毒接种鸭胚或鸡胚进行繁殖，收获的病毒液毒价≥10^8.5ELD₅₀/ml；血清3型鸭肝炎病毒接种鸡胚进行繁殖，收获的病毒液毒价≥10^8.0ELD₅₀/ml,接种鸭胚进行繁殖，收获的病毒液毒价≥10^8.5ELD₅₀/ml；鸭呼肠孤病毒接种鸡胚进行繁殖，收获的病毒液毒价≥10^8.0ELD₅₀/ml；鸭呼肠孤病毒可接种BHK细胞或Vero细胞或LMH细胞或DF-1细胞进行繁殖，收获的病毒液毒价≥10^8.5TCID₅₀/ml。

4. 本发明所述的一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗，其特征在于用该二联灭活疫苗给种鸭接种有效剂量的能使免疫种鸭和被动免疫雏鸭对鸭呼肠孤病毒、鸭肝炎病毒流行株产生有效保护。

本发明的积极意义