[发明专利]一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法

权利要求书

1.一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法，其特征在于，包括：

S1：制备3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液；

S2：通过电解氧化制备二氧化钛纳米管阵列，在二氧化钛纳米管阵列上原位合成类石墨氮化碳，得TNA/g-C₃N₄；

S3：使用三电极系统进行电化学接枝3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐到TNA/g-C₃N₄电极表面，其中TNA/g-C₃N₄为工作电极，铂片为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，以3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液为电解质溶液，在一定的电位窗口范围内通过循环伏安法进行扫描若干个循环，得到TNA/g-C₃N₄/DAT传感器；

S4：首先测量可见光照射下TNA/g-C₃N₄/DAT的光电流，记为I₀；将TNA/g-C₃N₄/DAT浸入若干组Tris-HCl缓冲溶液中，各组Tris-HCl缓冲溶液中含有一定浓度的Fe(III)、抗坏血酸2-磷酸酯和一定浓度的酸性磷酸酶，平衡一段时间，可见光照射，测得光电流值为I；传感器的光电流变化值△I＝I-I₀，根据△I与酸性磷酸酶的浓度C的变化关系获得线性回归方程为△I＝0.767C(U L^-1)+1.595，0.05U L^-1≤C≤100U L^-1；

S5：首先测量可见光照射下TNA/g-C₃N₄/DAT的光电流，记为I₀；将TNA/g-C₃N₄/DAT浸入Tris-HCl缓冲溶液中，Tris-HCl缓冲溶液中含有一定浓度的Fe(III)、抗坏血酸2-磷酸酯和未知浓度的酸性磷酸酶，平衡一段时间，可见光照射，测得光电流值为I；传感器的光电流变化值△I＝I-I₀，将△I代入步骤S4中的线性方程计算出待测酸性磷酸酶的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1具体包括：

配制3,5-二氨基-1,2,4-三唑的0.2M盐酸溶液，并通干燥氮气一段时间，然后在饱和氮气氛下将一定体积的亚硝酸钠溶液加入到3,5-二氨基-1,2,4-三唑盐酸溶液中，冰水浴中搅拌一段时间，生成3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的亚硝酸钠溶液与所述3,5-二氨基-1,2,4-三唑盐酸溶液的体积比为1：50。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2具体包括：通过电解氧化制备二氧化钛纳米管阵列,将二氧化钛纳米管阵列浸渍在一定浓度的尿素溶液中，静止保持一定时间，取出晾干，置于坩埚中并放入高温炉，盖上坩埚盖，升温至煅烧温度煅烧一段时间，得TNA/g-C₃N₄。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述尿素溶液的浓度为10wt％，二氧化钛纳米管阵列在尿素溶液中静止时间为8小时，高温炉的升温速率为3℃min^-1，煅烧温度为550℃，煅烧时间为3小时。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中，循环伏安法的电位窗口范围为-0.8至+0.6V，扫描速率为10mV s^-1，循环次数为15次。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S4和S5中，Tris-HCl缓冲溶液中Fe(III)和抗坏血酸2-磷酸酯的浓度分别为0.5μM和1.0μM。