[发明专利]一种D-葡萄糖的检测方法和应用

说明书

本发明提供了一种D‑葡萄糖的检测方法和应用，所述检测方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼进行检测。本发明提供的检测方法利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼与葡萄糖氧化酶(Gox)配合使用，可以实现对D‑葡萄糖的检测，对于其他非D‑葡萄糖的糖分子样品无响应，具有高的选择性；同时检测灵敏度高且D‑葡萄糖检测限(LOD)较低。

技术领域

本发明属于手性信号检测技术领域，涉及一种D-葡萄糖的检测方法和应用。

背景技术

手性识别对映异构体中的手性分子非常重要，特别是在立体选择性合成、生物传感、生物成像、医药领域等方面。因此，开发有效识别和定量对映纯分子的有效方法已成为现代纳米材料设计的主要动机。

迄今为止，已经对表面修饰的金属纳米颗粒、半导体以及碳基纳米材料等进行了深入研究，以用于生物分子的手性识别。但是，当前的方法主要依靠通过表面修饰(例如化学键合和静电引力)来调节纳米材料表面和手性配体之间的相互作用。尽管已经取得了很大的进步，但是纳米材料的稳定性和手性识别的敏感性仍然不能令人满意。

具有吸收波长可调的配体诱导的手性过渡金属氧化物因其广泛的潜在应用而引起了广泛的兴趣，包括生物传感、高光谱成像和光检测等。例如，Kotov等公开的用手性配体(如脯氨酸，天冬氨酸和半胱氨酸)修饰的手性WO_3-x和Co₃O₄纳米颗粒表现出很强的光学手性，当存在顺磁性时甚至会增强。在这种情况下，这种手性是由金属-配体电荷转移(MLCT)效应引起的，这是由于未配对电子从金属δ轨道过渡到基于配体的π和π*轨道而引起的，表明金属原子的价态对于此类原子非常重要。目前对于MLCT手性起源的研究仍然很少。

对于葡萄糖的检测一般基于紫外或荧光光谱分析，由于紫外、荧光的普适性，即大量物质存在紫外吸收或荧光发射光谱，检测特异性较低，无法直接识别手性葡萄糖(D-葡萄糖和L-葡萄糖)。

CN110231486A公开了一种葡萄糖的检测方法，包括一种葡萄糖检测试剂盒，包括葡萄糖氧化酶溶液、碱性水溶液、MnO₂ NPs和鲁米诺工作液；一种葡萄糖的检测方法，它包括：1)待测样品与浓度为0.8～1.5mg/mL的葡萄糖氧化酶溶液混合，在30～37℃下反应6-10min；2)取100μL反应后溶液与100μL NaOH水溶液、10μL浓度为0.01-1.0mg/mL MnO₂ NPs和鲁米诺工作液混合；3)测量CL信号，根据回归方程计算葡萄糖浓度。该专利虽然可以检测葡萄糖的浓度，但是并无法区分手性葡萄糖的浓度。

因此，需要提供一种可以识别检测手性葡萄糖的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种D-葡萄糖的检测方法和应用。本发明提供的检测方法利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼与葡萄糖氧化酶(Gox)配合使用，可以实现对D-葡萄糖的检测，对于其他非D-葡萄糖的糖分子样品无响应，具有高的选择性；同时检测灵敏度高且D-葡萄糖检测限(LOD)较低。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种D-葡萄糖的检测方法，所述检测方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼进行检测。

在本发明中，由于过氧化氢可以使二氧化钼的化学价发生变化，进而使手性半胱氨酸封端的二氧化钼的手性信号发生变化，而葡萄糖氧化酶只能特异性的催化D-葡萄糖氧化生成过氧化氢，因此，利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼可以特异性的识别检测D-葡萄糖。

在本发明中，所述检测方法包括如下步骤：

(1)绘制标准曲线；

(2)将待测样品与手性半胱氨酸封端的二氧化钼混合，检测混合溶液的圆二色光谱；