[发明专利]一种利用工业色谱技术制备丹酚酸类化合物的方法

说明书

本发明公开了一种利用工业色谱技术制备丹酚酸类化合物的方法，所述方法包括：丹参药材经提取、转化、大孔吸附树脂层析和工业色谱纯化步骤，得到高纯度丹酚酸类化合物。本发明所采用的工业色谱纯化工艺避免了大量有机萃取试剂的使用和繁杂的梯度洗脱工序，该方法可大量制备得到高纯度丹酚酸类化合物，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种分离纯化技术，特别涉及一种利用工业色谱技术制备丹酚酸类化合物的方法。

背景技术

丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge的干燥根及根茎，目前临床上其制剂广泛应用于缺血性心脑血管疾病的治疗。丹酚酸A是从丹参中提取的一种水溶性成分，近十多年的研究表明丹酚酸A对缺血心肌、游离脂肪酸导致的内皮细胞损伤、脑缺血再灌注损伤保护等方面有显著活性。

丹酚酸A在大鼠体内外表现出抗血小板聚集作用，丹酚酸A能够剂量依赖性的抑制二磷酸腺苷(ADP)、花生四稀酸(AA)和凝血酶(THR)诱导的血小板聚集。丹酚酸A不仅对血小板聚集具有全面温和的抑制作用，而且对血栓引起的脑缺血具有显著的保护作用(王海港,孔令雷,王睿等.丹酚酸A与阿司匹林抗血栓作用的比较研究[J].药学学报,2019,54(2):301-307.)。丹酚酸A对心肌缺血再灌注损伤大鼠心率变异性(HRV)和心肌损伤的影响，发现丹酚酸A可增加HRV，减少心肌梗死面积，发挥心肌保护作用(赵国胜,杨会杰,左保华等.川穹嗪和丹参对大鼠心脏氧反常保护作用的比较[J].天津医药,1996,24(5):289-292.)。丹酚酸A可显著降低实验性高脂血症大鼠血中总胆固醇、低密度脂蛋白水平，并对游离脂肪酸导致的内皮细胞损伤具有明显的保护作用(杨秀颖,强桂芬,宫丽丽等.丹酚酸A调节高脂血症大鼠血脂水平并保护游离脂肪酸导致的内皮细胞损伤[J].中国新药杂志,2013,22(24):2869-2873.)。丹酚酸A尾静脉注射可以显著降低可溶性环氧化物水解酶(sEH)在MCAO大鼠海马CA1区的表达，同时降低sEH活性从而上调MCAO大鼠血液和脑组织中环氧十二碳三稀酸(ETT)的水平，减少MCAO大鼠脑梗死体积，提示丹酚酸A通过抑制sEH对缺血性损伤发挥保护作用(Wang SB,Pang XB,Zhao Y,et al.Protection of salvianolic acid A onratbrain from ischemic damage via solubleepoxide hydrolase inhibition[J].Journal of Asian Natural Products Research,2012,14(11):1084-1092.)。丹酚酸A对缺血心肌、游离脂肪酸导致的内皮细胞损伤、脑缺血再灌注损伤有显著保护作用。

研究表明，SAA在体内主要经肝脏的儿茶酚氧位甲基转移酶(Catechol-O-methyl-transferase，COMT)和尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(Uridine-diphosphateglucuronosyltransferases，UGTs)代谢，生成包括葡醛酸和甲基结合在内的多种Ⅱ相结合代谢产物，成为其发挥体内药效作用的直接物质基础。许卉等利用具有高儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)活力的大鼠肝细胞液体外温孵代谢反应，首次制备了4种丹酚酸A(SAA)的甲基结合代谢物，其中就包括3-甲氧基丹酚酸A(许卉，李艳丽，田翠红等.丹酚酸A甲基结合代谢物的制备与结构鉴定[J].分析学研究报告，2014,42(1)：65-70.)。因此制备丹酚酸A的大鼠体内代谢产物3-甲氧基丹酚酸A用于心脑血管疾病治疗相关活性筛选和药物研发具有重要的意义。目前报道的只有许卉等利用具有高儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)活力的大鼠肝细胞液体外温孵代谢反应的方法制备得到少量纯度大于95％的3-甲氧基丹酚酸A用于结构鉴定，该方法不适合工业化生产。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种利用工业色谱技术制备丹酚酸类化合物3-甲氧基丹酚酸A的制备方法，该方法可大量制备得到纯度大于98％的3-甲氧基丹酚酸A，适合工业化生产，可以满足用于药理研究以及药物制剂生产的需求。