[发明专利]一种利用碳酸钙模板制备大豆蛋白多孔微球的方法

权利要求书

1.一种利用碳酸钙模板制备大豆蛋白多孔微球的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按1：3(w/v)的比例用正己烷对粉碎后得到的豆粉进行3次脱脂，并放在通风橱中除去正己烷，将除去正己烷的大豆粉末按1：10(w/w)溶于蒸馏水中，用2M NaOH将pH调节至8.5，并将所得浆液在27℃下机械搅拌2h，随后在9000×g下离心20min，收集上清液并用2M HCl调节pH置4.5，然后在6000×g下离心15min，将获得的沉淀物溶于蒸馏水中，用2M NaOH中和至pH 7.0，在4℃下用蒸馏水透析24h,然后于-40℃预冻后冻干，研磨以得到大豆分离蛋白粉末；(2)称取大豆分离蛋白粉末溶于0.33M氯化钙溶液中配制成3％(w/v)大豆分离蛋白溶液，室温磁力搅拌2h，在4℃下放置过夜以使蛋白质完全水合，加入叠氮化钠(0.02％，w/v)以抑制微生物生长。0.33M氯化钙和0.33M碳酸钠1：1混合，在1000r磁力搅拌10分钟。(3)制备完成碳酸钙后加入水化后的大豆分离蛋白配制成0.01％-0.25％(W/V)的悬浮液，不改变转速，持续搅拌至30分钟，加入谷氨酰胺转氨酶0.02-0.1unit/mg大豆分离蛋白，在30-40℃,转速为100-1000r搅拌2小时，稀释一倍后，按照体积比1：0.5-1：3加入EDTA，在室温下搅拌5-48小时，即脱去碳酸钙模板，制备完成大豆蛋白多孔微球。

2.根据权利要求1所述的一种利用碳酸钙模板制备大豆蛋白多孔微球的方法，其特征在于：所述大豆分离蛋白与碳酸钙制备成悬浮液的优选比例为0.15％。

3.根据权利要求1所述的一种利用碳酸钙模板制备大豆蛋白多孔微球的方法，其特征在于：谷氨酰胺转氨酶的优选用量为0.08unit/mg大豆分离蛋白，优选温度为37℃，优选转速为200r。

4.根据权利要求1所述的一种利用碳酸钙模板制备大豆蛋白多孔微球的方法，其特征在于：加入EDTA的与原悬浮液的优选比例为1：1，优选搅拌时间为24小时。