[发明专利]用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法

说明书

本发明公开了一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法，涉及生物标志物检测技术领域。本发明公开的检测试剂，其包括第一检测试剂和第二检测试剂中的至少一种。采用本发明提供的检测试剂、试剂盒或方法检测阿尔兹海默病的生物标记物，能够简便、准确、高效地对生物标志物定量检测，能够满足对灵敏性和特异性等方面的要求，对于阿尔兹海默病的早期诊断具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及生物标志物检测技术领域，具体而言，涉及一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法。

背景技术

阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种严重的大脑神经退行性疾病，多发于老年人，疾病进展会导致严重的认知功能损害和记忆障碍。由于目前还没有治愈的方法，因此AD的早期诊断至关重要。有研究表明，血清中的Aβ蛋白和tau蛋白可以作为AD临床实验室诊断的可能标志物。目前临床主要依赖ELISA法检测AD患者脑脊液中两种蛋白水平，此方法通常受到交叉反应和高非特异性结合的影响，灵敏性低，检测限只可达0.312ng/mL和0.15ng/mL，并且脑脊液的采集对患者创伤大。因此，急需一种超灵敏的分析方法来选择性测量血液样本中的Aβ蛋白和tau蛋白水平。

拉曼光谱技术能够反映物质分子的结构信息，不同生物分子呈现出其特异的光谱峰位和强度特征，可用作生物分子的“指纹鉴定”。表面增强拉曼散射光谱技术(SERS)能利用贵金属纳米材料的表面等离子体共振效应，使吸附在金属粗糙表面的生物分子的拉曼信号强度增大10³～10⁶倍，具有较高的灵敏度和特异度，从而使其成为一种检测痕量生物分子的重要工具,并应用于肿瘤标志物的鉴定。

但是现有的使用表面增强拉曼散射光谱技术检测阿尔兹海默病生物标志物Aβ蛋白和tau蛋白的相关试剂盒等拉曼增强效果不理想，并且对目标分子的检测灵敏度低。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法。采用本发明提供的检测试剂、试剂盒或方法检测阿尔兹海默病的生物标记物，能够简便、准确、高效地对生物标志物定量检测，能够满足对灵敏性和特异性等方面的要求，对于阿尔兹海默病的早期诊断具有重要的意义。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂，其包括第一检测试剂和第二检测试剂中的至少一种；

所述第一检测试剂包括同时负载有第一抗体和拉曼信号分子的纳米金属颗粒；

所述第二检测试剂包括负载有第二抗体的SERS基底，所述SERS基底为磁性氧化石墨烯；

其中，所述第一抗体和所述第二抗体均能够特异性结合所述阿尔兹海默病的生物标记物。

本发明实施例提供的检测试剂包括第一检测试剂和第二检测试剂，其中第二检测试剂以磁性氧化石墨烯作为基底并负载能够特异性结合所述生物标记物的第二抗体，第一检测试剂包括负载有第一抗体和拉曼信号分子的纳米金属颗粒，本发明的发明人通过利用磁性氧化石墨烯作为基底和利用纳米金属颗粒增强拉曼散射的特性，以及利用双抗夹心法的检测原理设计出上述的用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂，并通过实验验证惊喜了发现，使用本发明的检测试剂检测时，提高了检测的灵敏度和拉曼散射的效果，克服了现有检测试剂灵敏低和拉曼散射效果不理想的问题。

本发明提供的检测试剂同时也为阿尔兹海默病的早期诊断提供了新的选择和思路。