[发明专利]一种内外照射诱变纤维用竹愈伤组织的育苗方法

说明书

本发明公开了一种内外照射诱变纤维用竹愈伤组织的育苗方法，选取竹分枝茎芽诱导的愈伤组织，通过注射诱变剂进行内照射，再经诱变剂震荡诱变，接种在分化培养基上培养后，经生根培养基培养，15～30天后获得完整的再生植株，用ISSR分子标记技术筛选得到突变体植株，筛选具有优良性状的纤维用竹新种质。本发明具有操作简单，选育材料广泛，后代性状稳定快，选育时间短的特点。

技术领域

本发明属于植物辐射诱变育种技术领域，具体涉及一种内外照射诱变纤维用竹愈伤组织的育苗方法。

背景技术

制浆造纸工业是中国乃至世界经济的重要支柱产业之一，在我国经济飞速发展的同时，对纸的需求量会迅速不断的增加。由于在我国森林资源比较短缺和森林保护系列相关的法律政策的不断完善，以及造纸产业链中的废纸回收利用率比较低，木材资源的缺口很大程度上只能依靠进口来弥补，国家不得不花费大量的资金进口木材和木浆。然而，竹作为一种在我国分布广泛的植物自然资源，具有分布广、适应性强、生长快、成才早、经济价值高等特点，一次造林成功后，经过3-5年就可以年年砍伐，且持续几十年以致上百年。竹材的纤维素含量在40％-60％，其优良的制浆性能可与部分木材纤维比美，并且竹浆的纤维形态质量介于草浆和木浆之间，更接近于木浆，这些都促使其成为一种优良的非木材类造纸原材料。因此，培育生物量大、纤维素高的浆用竹品种对提高竹浆造纸的可持续发展有重要意义。

中国是利用竹材造纸最早的国家，已有1700多年的历史。全球约有1200余种竹，中国约有39属600余种。常用制浆竹材仅是30多种原生乡土丛生混合竹种。中国的竹子研究历史和现状相对领先于世界其它国家，但由于竹子遗传背景的复杂性和生物学的特殊性，即竹类植物开花具有不确定性，且开花后即死亡等特点，很难通过传统的育种方法对其进行品种改良。现有纤维用竹良种选育主要是从自然突变选育或从异地引种驯化进行无性繁殖，而且品种类型比较单一。此外，竹类遗传转化体系尚不成熟，很难通过基因工程的手段对其进行遗传改良。迄今为止，还没有建立一套纤维用竹新种质资源创制和筛选的现代生物技术体系。随着竹材工业化利用的快速发展以及人们生活水平的不断提高，对定向培育适合不同用途的纤维用竹新品种的创制和选育提出了更新更高的要求。

竹秆上在某些节处可以长出分枝，分枝的茎节处可以萌发出芽，易于取材，易于离体诱导愈伤组织并获得再生植株的良好外植体材料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纤维用竹愈伤组织内外照射诱变创制新种质的方法，通过ISSR分子标记检测突变体，并辅助于表型筛选，可培育出不同用途的优质速生竹材。

本发明具体通过以下技术方案实现：

一种内外照射诱变纤维用竹愈伤组织的育苗方法，包括以下步骤：

1)选取纤维素含量40％～60％、木质素含量20％～30％的竹子，取其分枝茎芽诱导的愈伤组织；

2)在选取的愈伤组织中注射诱变剂溶液；

3)将诱变后的愈伤组织置于诱变剂溶液中继续震荡诱变；

4)震荡诱变的愈伤组织接种在分化培养基上培养后，经生根培养基培养，15～30天后获得完整的再生植株；

5)用ISSR分子标记筛选得到突变体植株，筛选具有优良性状的纤维用竹新种质。

进一步的，步骤(1)中所述的竹子选自慈竹、梁山慈竹、绿竹、硬头黄竹、孝顺竹、佯黄竹、牡竹、青皮竹或粉单竹中之一种。

进一步的，步骤(1)中所述的分枝茎芽采用MS2培养基诱导培养。

进一步的，步骤(2)中所述的诱变剂为放射性碘化钠，放射性碘化钠溶液浓度为10～30GBq。

进一步的，步骤(3)中所述的震荡条件为：震荡30～180min，震荡速度90rpm。