[发明专利]一种N-乙酰神经氨酸的分离提取方法

权利要求书

1.一种N-乙酰神经氨酸的分离提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将含有聚唾液酸的溶液酸解，得到酸解液；

(2)将步骤(1)得到的酸解液过第一膜，去除固体杂质，得到第一透过液；将第一透过液过第二膜，去除大分子杂质，得到第二透过液；将第二透过液过第三膜，除去一价盐，收集截留液；

(3)将截留液的pH调节到N-乙酰神经氨酸等电点，再经电渗析除去多价盐，将去除多价盐的溶液通过阴离子交换树脂洗杂、洗脱，收集流出液，浓缩得到浓缩液；

(4)将步骤(3)所得浓缩液的pH调节到1～3，降温，加入反向溶剂，析出晶体，离心，洗涤干燥，即得；

步骤(1)中，所述的含有N-乙酰神经氨酸溶液为含有聚唾液酸的发酵溶液；

步骤(2)中，所述的第一膜为陶瓷膜；陶瓷膜的孔径为50～500nm；所述的第二膜为超滤膜，其的截留分子量为2000～10000Da；所述的第三膜为纳滤膜，其的截留分子量为100～500Da；

步骤(3)中，所述的电渗析的运行模式为恒流模式；运行电流为0.1～1A；浓缩室和淡化室的体积比1:1；流速控制在40～100mL/min；去除多价盐的溶液后淡化室的电导率低于2ms/cm；

步骤(4)中，所述的反向溶剂为丙酮、丙醇和异丙醇中的任意一种或几种组合；反向溶剂与调节pH后浓缩液的体积比为0.8：1。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的酸解为pH 1.5～3.5，65～90℃下酸解4～8h。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述pH的调节物为磷酸、硫酸和盐酸中的任意一种或几种组合。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的阴离子交换树脂为阴离子交换树脂AD-1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的洗杂，其洗杂剂为水；洗杂的流速为1～2BV/h；洗杂的体积为2～8BV；所述的洗脱，其洗脱液为酸溶液或盐溶液；洗脱的流速为1BV/h；洗脱的体积为3～15BV；洗脱至洗脱液中不含有N-乙酰神经氨酸结束洗脱。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的酸溶液为盐酸、硫酸、甲酸和醋酸中的任意一种或几种组合；所述的盐溶液为氯化钠水溶液、氯化钾水溶液和氯化镁水溶中的任意一种或几种组合；所述酸溶液和盐溶液的浓度均为0.05～1mol/L。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的浓缩液中N-乙酰神经氨酸的浓度为150～500g/L。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的降温为降温至20～35℃。