[发明专利]一种提高重组蛋白疫苗安全性的方法及其应用在审
| 申请号： | 202010028239.5 | 申请日： | 2020-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN111138517A | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 徐高原;周明光;白红英;张丽华;明凡;高尚;金建云 | 申请（专利权）人： | 武汉科前生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/08 | 分类号： | C07K14/08;C07K1/30;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 陈征 |
| 地址： | 430206 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 重组 蛋白 疫苗 安全性 方法 及其 应用 | ||
1.一种提高重组蛋白疫苗安全性的方法，其特征在于，包括：
向表达所述重组蛋白的细菌发酵产物破碎后的上清液中加入饱和硫酸铵溶液，回收蛋白质沉淀；
所述重组蛋白为传染性法氏囊病病毒的衣壳蛋白VP2；
所述饱和硫酸铵溶液的pH为7.2～7.4，加入至所述上清液中后所述饱和硫酸铵溶液的浓度为35％～50％。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述饱和硫酸铵溶液pH为7.2～7.4，加入至所述上清液中后所述饱和硫酸铵溶液的浓度为50％。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述回收蛋白质沉淀的具体步骤为：
在2～8℃的条件下搅拌2～4小时后进行离心。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述细菌为大肠杆菌。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，还包括：
将所述蛋白质沉淀溶于PBS溶液后进行透析除去硫酸铵。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述PBS溶液的体积为所述上清液的20％～33％。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述除去硫酸铵的具体方法为，以PBS溶液为透析液，在2～8℃以下进行透析。
8.权利要求1-7任一项所述方法在去除蛋白溶液中内毒素中的应用，其特征在于，所述蛋白溶液为表达重组蛋白的细菌的发酵产物破碎后的上清液。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述重组蛋白为传染性法氏囊病病毒的衣壳蛋白VP2，所述细菌为大肠杆菌。
10.权利要求1-7任一项所述方法在提高重组蛋白疫苗安全性中的应用，其特征在于，所述重组蛋白为传染性法氏囊病病毒的衣壳蛋白VP2。
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