[发明专利]一种非变性牦牛皮胶原蛋白及其制备方法

权利要求书

1.一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)预处理：将新鲜牦牛皮脱毛，剔除皮下脂肪，洗净沥干后切成小碎块，备用；

(2)脱脂去杂：于步骤(1)得到的牦牛皮碎块中加入碱性溶液并不断搅拌脱脂，然后使用蒸馏水洗涤至pH为中性，之后加入氯化钠溶液不断搅拌去杂，最后使用蒸馏水洗至pH为中性；

(3)酸化匀浆：于步骤(2)处理后的牦牛皮碎块中按料液比1:5～10kg/L加入醋酸溶液，浸泡8～15h后进行匀浆；

(4)酶解：于步骤(3)所得的浆液中按料液比1:10～20kg/L加入醋酸溶液，之后加入胃蛋白酶，酶解提取12～24h后离心，收集上清液；

(5)盐析纯化：于步骤(4)得到的上清液中加入饱和食盐水，并不断搅拌至无白色絮状物继续析出，之后静置、离心，收集沉淀物；

(6)等电点纯化：用醋酸溶液溶解步骤(5)获得的沉淀物，之后使用NaOH调节pH至6.5～7.0，静置，离心，收集沉淀物；

(7)脱盐：用醋酸溶液溶解步骤(6)获得的沉淀物，之后调节pH，依次通过强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂、大孔丙烯酸系弱碱阴离子交换树脂进行脱盐处理；

(8)干燥：将脱盐后的胶原蛋白溶液真空冷冻干燥，灭菌，即得到成品非变性牦牛皮胶原蛋白。

2.如权利要求1所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(2)至步骤(7)均在4～10℃的低温条件下进行。

3.如权利要求1所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，搅拌脱脂的时间控制为12～24h，搅拌去杂的时间控制为5～10h。

4.如权利要求1所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，碱性溶液为质量浓度3％～5％的碳酸钠溶液，氯化钠溶液的质量浓度为2％～7％。

5.如权利要求1所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，控制牦牛皮碎块与碱性溶液的料液比为1:5～10kg/L，控制牦牛皮碎块与氯化钠溶液的料液比为1:3～8kg/L。

6.如权利要求2所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(6)、步骤(7)中，醋酸溶液的浓度为0.05～0.1mol/L。

7.如权利要求2～6任一所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(3)、步骤(4)中，醋酸溶液的浓度为0.05～0.2mol/L。

8.如权利要求2～6任一所述的一种非变性牦牛皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述步骤(4)、步骤(5)和步骤(6)中，离心速率为8000～10000rpm，离心时间为15～30min。

9.采用权利要求1～6任一所述方法制备的非变性牦牛皮胶原蛋白。