[发明专利]细胞培养基及制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种细胞培养基及制备方法和应用，涉及细胞培养技术领域，本发明提供的细胞培养基，包括基础培养基，及添加在所述基础培养基中的细胞因子、激素、蛋白、生物胺、抑制剂和溶衰素。其中，基础培养基可以在有效保持细胞环境稳定的同时，保持细胞的活性。通过向基础培养基中添加细胞因子、激素、蛋白、生物胺、抑制剂和溶衰素，一方面通过各组分之间的协同作用，能够代替传统培养基中的动物源成分，保证细胞培养基的稳定性，减少疾病传播和免疫反应的风险。另一方面，上述各组分相互配合，能够保持细胞活性，使细胞稳定、快速地增殖，极大提高细胞的原代分离效率，改善细胞的自我更新能力和组织修复能力。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，尤其是涉及一种细胞培养基及制备方法和应用。

背景技术

体外细胞培养是细胞生物学研究中的重要且常用技术，其变量包括培养基(基础培养基和补充物)、培养表面基质、细胞接种密度和理化环境，以及传代培养方案。其中，培养基可以说是最关键的因素。传统培养基中添加胎牛血清(FBS)，存在感染和免疫反应的潜在风险。为了减少这些风险，人们致力于开发人源补充剂，包括人血清和血小板裂解物。然而，使用人源补充剂是相当有争议的，主要是因为有限的来源和疾病在供者和患者之间传播的可能性。此外，人源替代品成分不清、稳定性差，可能导致培养基特性不一致性，从而使细胞生产过程难以标准化。显然，理想的情况是排除这些不明确的补充剂。

目前，市场上可以获得一些商业化培养基，但这些商业化培养基的组分是保密的，所以不清楚它们的组分是否完全是明晰的。此外，这些商业化的无血清、无动物源成分的培养基由于性能不佳，在支持细胞尤其是干细胞的临床培养方面表现一般。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种细胞培养基，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供上述细胞培养基的制备方法。

本发明的第三个目的在于提供上述细胞培养基的应用。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，提供了一种细胞培养基，所述细胞培养基包括基础培养基、细胞因子、激素、蛋白、生物胺、生物抑制剂和溶衰素。

根据本发明的第二个方面，提供了上述的细胞培养基的制备方法，包括：取配方量的各组分加入基础培养基中并混合均匀，得到所述细胞培养基。

根据本发明的另一方面，还提供了上述的细胞培养基在培养细胞中的应用。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明提供的细胞培养基，包括基础培养基，及添加在所述基础培养基中的细胞因子、激素、蛋白、生物胺、生物抑制剂和溶衰素。其中，基础培养基可以在有效保持细胞环境的稳定同时，保持细胞的活性。通过向基础培养基中添加细胞因子、激素、蛋白、生物胺、生物抑制剂和溶衰素，一方面通过各组分之间的协同作用，能够代替传统培养基中的动物源成分，保证细胞培养基的稳定性，减少疾病传播和免疫反应的风险。另一方面，上述各组分相互配合，不同的组分提供不同方面的营养和支持，培养基整体则提供了完善的营养以及充足的刺激和支持，促进细胞的原代分离和增殖，提高活力、自我更新能力和组织修复能力。尤其是生物抑制剂可以抑制细胞衰老，提高原代分离效率、扩增效率、活力和自我更新能力，溶衰素可以清除细胞群体中的衰老细胞从而阻止其引起细胞群整体的衰老和功能障碍，保持细胞群整体的活力和干性。

应用本发明提供的细胞培养基培养细胞，能够保证细胞的高效增殖，短期内即可大量扩增高纯度的细胞，对于临床应用或基础研究均有重要贡献。

本发明提供的上述细胞培养基的制备方法，工艺简单、操作方便，只要取各组分混合均匀，即可得到细胞培养基。该制备方法无需借助昂贵的仪器，能够有效节约成本，适合大规模生产应用。