[发明专利]肿瘤特异性抗原CTL表位肽及其应用

说明书

本发明公开了一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还提供了含所述多肽的药物组合物、食品或保健品及多肽的对应用途。本发明筛选获得表位肽，通过体内外胞内因子染色和细胞杀伤实验等对表位肽进行鉴定，为后续研制基于肿瘤突变抗原的疫苗以及诊断制剂提供了理论基础，并为设计基于该表位的TCR‑T(T细胞受体‑T淋巴细胞)及混合T细胞表位的肿瘤多表位疫苗提供更多的选择。

技术领域

本发明具体涉及肿瘤特异性抗原CTL表位肽及其应用。

背景技术

肿瘤免疫治疗凭借卓越的临床疗效和创新性位居Science杂志2013评选的十大科学突破之首。2018年度诺贝尔生理学或医学奖授予在免疫检查点阻断疗法领域具有突出贡献的James Allison教授与Tasuku Honjo教授。自2011年至今，FDA已批准多款靶向免疫检查点CTLA-4(Ipilimumab)、PD-1(Nivolumab、Pembrolizumab、Cemiplimab)等单抗药物用于治疗肿瘤患者。高通量测序技术不断发展，大量研究显示免疫检查点阻断疗法的效果与肿瘤突变负荷正相关。肿瘤突变负荷(tumor mutation burden，TMB)为基于全基因组测序、全外显子或target pannel测序，肿瘤基因组去除胚系突变(germline mutation)后的体细胞突变数量(somatic mutation)。肿瘤突变负荷越高其可能产生的突变抗原数量越多，而免疫疗法依赖于患者体内免疫细胞对肿瘤特异性抗原表位的识别，所以肿瘤突变负荷越高患者越可能从免疫疗法中获益。2016年，在《Science》杂志中发表的研究表明肿瘤中突变抗原(mutant antigen)丰富的晚期黑色素瘤、非小细胞肺癌患者对CTLA-4、PD-1单抗药物的敏感性增强。在后续的大量研究中发现，无论癌症的组织起源是什么，大量的突变抗原会使其对免疫检查点阻断疗法更敏感。所以在肿瘤免疫治疗策略中，突变抗原的表达和识别已成为决定癌症免疫疗法临床疗效的主要因素之一。

突变抗原为肿瘤特异性抗原(tumor specific antigen，TSA)，区别于肿瘤相关抗原(tumor associated antigen，TAA)。肿瘤突变抗原是指那些可以被免疫细胞识别并能够激活免疫系统、由癌细胞基因突变所产生的异常蛋白质。因突变抗原为肿瘤组织特异，相较于肿瘤相关抗原具有多靶点、广谱、安全的特点。基于肿瘤突变抗原表位的研究已经取得诸多研究成果。

食管鳞癌高发于中国，河南北部林县、安阳、辉县所处的太行山地带为中国食管鳞癌发病率及死亡率最高的地区。目前仍然未有针对食管鳞癌的免疫治疗药物获批上市。高通量测序技术证明食管鳞癌中存在大量基因突变，具有较高的TMB值，有很大的可能产生突变抗原。在我国人群中HLA-A2亚型频率超过50％，因此鉴定该亚型限制性表位更具有实际治疗意义。随着肿瘤免疫治疗及二代测序技术的发展，对大量的食管鳞癌患者进行全外显子测序的结果显示食管鳞癌中存在大量突变抗原，提示这些突变抗原可能成为食管鳞癌免疫治疗的新靶点。

发明内容

第一方面，本发明提供一种肿瘤特异性突变抗原PCLO-E4090Q来源的抗肿瘤CTL表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

所述表位肽可通过固相合成制得，如采用标准Fmoc方案制备。

第二方面，本发明提供了含所述表位肽的食品、保健品或药物组合物，药物组合物可包括多肽、融合蛋白、DNA、TCR-T构建及其药学上可接受的载体或赋形剂等形式，其药用形式可为疫苗。

第三方面，本发明提供了所述表位肽在制备所述食品、保健品或药物组合物中的用途。

第四方面，本发明提供编码所述表位肽的DNA分子，或由含有编码所述表位肽的DNA分子编码的重组蛋白。