[发明专利]产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法、菌株及其制备得到的脂肪酶

权利要求书

1.一种产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

首先采集含有近平滑假丝酵母菌株的土壤并接种到富集培养液中对菌株进行富集培养，然后将富集得到的培养液涂布于乳化平板培养基中进行筛选培养，随后将筛选培养后的菌落进行纯化得到产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株。

2.根据权利要求1所述的产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法，其特征在于，所述富集培养液主要由碳酸铵、硝酸铵、七水硫酸镁和磷酸氢二钾组成；

优选的，所述每L富集培养液中包括硫酸铵0.14～0.16g、硝酸铵0.08～0.1g、七水硫酸镁0.04～0.06g、磷酸氢二钾0.01～0.02g和橄榄油0.01～0.03L，所述富集培养液的pH为6～8；

更优选的，所述富集培养液的pH为7。

3.根据权利要求1所述的产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法，其特征在于，所述菌株富集培养的次数为3～5次；

优选的，每次富集培养的时间为10～15h。

4.根据权利要求1所述的产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法，其特征在于，所述乳化平板培养基为维多利亚蓝乳化平板培养基；

优选的，所述维多利亚蓝乳化平板培养基主要由硫酸铵、氯化钠、硝酸铵、七水硫酸镁、磷酸氢二钾、琼脂粉和维多利亚蓝溶液组成；

更优选的，每L维多利亚蓝乳化平板培养基中包括硫酸铵1～1.5g、氯化钠1～1.5g、硝酸铵0.5～1g、七水硫酸镁0.5～1g、磷酸氢二钾0.1～0.3g、琼脂粉15～25g。

5.一种产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株，其特征在于，所述产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株由上述权利要求1～4任一项所述的产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株的筛选方法筛选得到。

6.一种脂肪酶，其特征在于，所述脂肪酶由权利要求5所述的产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株发酵纯化制得。

7.一种脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述脂肪酶的制备方法包括以下步骤：

将权利要求5所述产脂肪酶的近平滑假丝酵母菌株接种于发酵培养基中发酵培养并纯化，得到所述脂肪酶。

8.根据权利要求7所述的脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述近平滑假丝酵母菌株的接种量为0.5～2wt％。

9.根据权利要求7所述的脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基为加入脂肪的酵母蛋白胨培养基。

10.根据权利要求7所述的脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述发酵培养为摇瓶培养，所述摇瓶培养的温度为25～35℃、转速为150～250r/min、时间为60～75h。