[发明专利]柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202010036329.9 | 申请日： | 2020-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN111196847A | 公开（公告）日： | 2020-05-26 |
| 发明（设计）人： | 刘群;宋星桔;刘晶;杨旭;许建海 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/455 | 分类号： | C07K14/455;C12N15/11;C12N15/70;C07K16/20;A61K39/012;A61P33/02 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 贾慧娜;王芊雨 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柔嫩 艾美耳球虫微线体 蛋白 相关 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白，其特征在于，命名为EtM2AP，具有如SEQID NO.1所示的氨基酸序列。
2.一种柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白，其特征在于，命名为EtM2AP，具有SEQID NO.1中的部分氨基酸序列，该部分氨基酸序列能够表达出活性蛋白质片段。
3.如权利要求1所述的柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白，其特征在于，编码该柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.用于扩增权利要求3所述的核苷酸序列的引物，其特征在于，具有以下序列：
上游引物：AGCAAATGGGTCGCGGATCCAGAGTCCCAGGCGAAGATAG(SEQ ID NO.3)，
下游引物：TCGAGTGCGGCCGCAAGCTTGGATGACTGTTGAGTGTCACTCT(SEQ ID NO.4)。
5.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求3所述的核苷酸序列。
6.一种重组蛋白，其特征在于，包含权利要求1所述的氨基酸序列。
7.一种重组蛋白疫苗，其特征在于，包括权利要求6所述的重组蛋白和佐剂。
8.权利要求6所述的重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
基因扩增：通过权利要求4所述的引物以柔嫩艾美尔球虫子孢子的cDNA为模板扩增出EtM2AP基因序列；
重组载体构建：将扩增出的EtM2AP基因序列与pET-28a骨架构建重组载体；以及
重组蛋白表达：将上述重组载体通过IPTG进行诱导表达，并通过Westernbloting鉴定，即得。
9.一种能够与权利要求1所述的柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白特异性结合的抗体或血清。
10.权利要求1所述的柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白在制备预防鸡球虫病疫苗中应用。
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