[发明专利]一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物内源游离氨基酸的方法

权利要求书

1.一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物组织内源游离氨基酸的方法，其步骤包括：

（1）取植物组织，粉碎后加入提取液进行提取，提取完成后用有机相滤膜过滤，将提取液稀释5~20倍，得到含有内源游离氨基酸的检测样品，所述的植物组织与提取液的料液比为1g：15 ~ 20ml；

（2）利用超高效液相色谱-串联质谱对检测样品进行分析，得到植物组织中内源游离氨基酸的种类和数量；其中，所述的提取液由甲醇、水和甲酸组成，其中甲醇、水和甲酸的体积比为70~80：29~19：1；

其中超高效液相色谱使用的色谱柱是ACQUITY UPLC HSS T3，规格: 2.1mm * 100 mm,1.8 μm；超高效液相色谱的流动相A：超纯水，含0.1%甲酸；B：乙腈，含0.1%甲酸，梯度洗脱条件如下：

时间 (min)	流速 (ml/min)	A （%）	B（%）
Initial	0.1	98	2
2.0	0.1	98	2
5.0	0.1	90	10
5.1	0.3	10	90
8.0	0.3	10	90
8.1	0.1	98	2
10.0	0.1	98	2

；

步骤（2）中，所述的内源游离氨基酸为甘氨酸、L-丙氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、L-丝氨酸、L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、顺式-4-羟基-L-脯氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-天冬氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-谷氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-酪氨酸、L-间酪氨酸和L-色氨酸。