[发明专利]氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用

说明书

本发明涉及有机化工及线粒体用途领域，公开了一种氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用，该氟硼荧光染料组成探针后，在聚集时表现出深红色到近红外的发射，并且具有高度生物相容性能够特别“点亮”细胞线粒体，通过一种超快速且易于操作的染色方法对活细胞进行染色。更重要的是，它们在连续强激光照射下都表现出很高的光稳定性，显示出它们在生物医学和材料科学中的潜在应用。

技术领域

本发明涉及有机化工及线粒体用途领域，具体地，涉及一种氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用。

背景技术

线粒体，作为为几乎所有真核细胞的动力，是重要的亚细胞器，为各种生命活动提供能量。例如，线粒体可产生三磷酸腺苷(ATP)，涉及一系列电子传递过程，与活性氧的产生有关。线粒体功能紊乱会导致活性氧水平异常，最终导致许多疾病，如人类心血管疾病，神经退行性疾病、雷氏综合征或肿瘤。荧光生物成像作为一种无创的生物系统过程可视化方法，具有高分辨率、高对比度、高灵敏度的实时监测能力，在早期图像引导诊断中具有广阔的应用前景，可监测或可视化其形态或生物活性，为研究细胞凋亡和退行性变状况，从而在疾病诊断中发挥不可或缺的作用。为了观察活体样品的长期动态跟踪，光稳定性是荧光成像的一个特别重要的参数。然而，传统的荧光探针，特别是商业上可用的线粒体特异性染料，如 Green FM和 Deep Red FM，在连续激光照射下，光稳定性差。此外，当这些商用探针的浓度逐渐增加时会出现聚集猝灭(ACQ)现象，它们的荧光强度会减弱。因此，由于伴随着ACQ效应，荧光团浓度的增加不能提高发光强度。

发明内容

本发明的目的是提供一种氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用，解决了传统的荧光探针，特别是商业上可用的线粒体特异性染料，在连续激光照射下，光稳定性差，伴随着ACQ效应，荧光团浓度的增加不能提高发光强度的问题。

为了实现上述目的，本发明提供一种氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用。

所述氟硼荧光探针的结构式为：

其中，所述R为H或者乙基。

优选地，所述应用包括将氟硼荧光染料在不良溶剂中自组装形成纳米探针，利用纳米探针对细胞线粒体进行荧光染色。

优选地，将氟硼荧光染料和二甲基亚砜混合，之后加入1640完全培养基，形成包含探针的溶液。

通过上述技术方案，本发明提供了一种氟硼荧光探针在线粒体定位中的应用，该氟硼荧光染料组成探针后，在聚集时表现出深红色到近红外的发射，并且具有高度生物相容性能够特别“点亮”细胞线粒体，通过一种超快速且易于操作的染色方法对活细胞进行染色。更重要的是，它们在连续强激光照射下都表现出很高的光稳定性，显示出它们在生物医学和材料科学中的潜在应用。

本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1a，1e分别为探针1和2的归一化吸收光谱(黑色虚线为探针二氯甲烷溶液)、归一化荧光光谱(曲线为不同溶剂)和固态光谱(紫色虚线)中的荧光发射，以及在日光和365nm紫外线灯照射下的粉末照片(插入小图)；

图1b，1f分别为探针1和2(30μM)在DMSO/去离子水(DI)中的荧光光谱(去离子水在在DMSO/去离子水体系中所占比例为fw)，激发波长490nm，以及插图分别为探针1和2(30μM)在DMSO和DMSO/DI体系(95％和99％含水量)中紫外光照射下的照片；

图1c，1g分别为探针1和2(30μM)在不同水组分DMSO/DI中的吸收光谱；