[发明专利]一种高通量测序文库定量检测结果校正的方法及检测方法

权利要求书

1.一种高通量测序文库定量检测结果校正的方法，其特征在于：包括以下步骤，

(1)采用与待测高通量测序文库相同物种的核酸样品，对核酸样品进行相同的高通量测序文库构建，获得与待测高通量测序文库特征相似的测序文库，作为内控品，将内控品的簇密度标记为理论簇密度；

(2)采用相同的高通量测序文库定量检测方法，对内控品进行浓度测定，标记为内控品定量浓度，根据测定的内控品定量浓度进行上机测序；

(3)根据测序结果分析内控品的实际簇密度，根据公式一计算内控品实际浓度；

公式一：内控品实际浓度＝内控品定量浓度×[2-(理论簇密度/实际簇密度)]

其中，内控品实际浓度和内控品定量浓度的单位均为nmol/L，理论簇密度和实际簇密度的单位均为％；

(4)将内控品实际浓度与内控品定量浓度的比值作为校正系数，待测高通量测序文库的定量检测结果乘以所述校正系数，获得待测高通量测序文库的实际浓度，即实现高通量测序文库定量检测结果校正。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤(4)之前，还包括按照步骤(1)至(3)对梯度稀释的内控品进行内控品实际浓度检测，获得不同梯度稀释内控品对应的校正系数，取其平均值，即校正系数平均值；将待测高通量测序文库的定量检测结果乘以所述校正系数平均值，获得待测高通量测序文库的实际浓度，即实现高通量测序文库定量检测结果校正。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述对梯度稀释的内控品进行内控品实际浓度检测，具体包括，将原始内控品的内控品定量浓度定义为C₀，分别采用二分之一C₀浓度的内控品，标记为1/2C₀，和四分之一C₀浓度的内控品，标记为1/4C₀，进行内控品实际浓度检测；C₀浓度的内控品检测获得的内控品实际浓度标记为A₀，1/2C₀浓度的内控品检测获得的内控品实际浓度标记为A_1/2，1/4C₀浓度的内控品检测获得的内控品实际浓度标记为A_1/4；根据公式二计算校正系数平均值，

公式二：校正系数平均值＝[A₀/C₀+A_1/2/(1/2C₀)+A_1/4/(1/4C₀)]÷3。

4.一种高通量测序文库的定量检测方法，其特征在于：包括采用高通量测序文库定量检测试剂盒对待测高通量测序文库进行定量检测，将待测高通量测序文库的试剂盒定量检测浓度乘以校正系数或校正系数平均值，即获得待测高通量测序文库的实际浓度；

所述校正系数采用权利要求1所述的方法计算获得，所述校正系数平均值采用权利要求2或3所述的方法计算获得。