[发明专利]一种含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法有效
| 申请号： | 202010044507.2 | 申请日： | 2020-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN111060643B | 公开（公告）日： | 2021-04-02 |
| 发明（设计）人： | 唐惠儒;王玉兰;陈子亮;喻门 | 申请（专利权）人： | 博莱克科技（武汉）有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/89 | 分类号： | G01N30/89 |
| 代理公司： | 武汉臻诚专利代理事务所(普通合伙) 42233 | 代理人： | 胡星驰 |
| 地址： | 430073 湖北省武汉市洪山区*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 含有 同分异构 胆汁 代谢 组分 分离 方法 | ||
1.一种含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，采用反相高效液相色谱梯度洗脱法，其流动相系统为：A、超纯水，B、乙腈；采用C18填料的反相色谱柱；
起始流动相中B相的体积比例在25%至27%；
在T-α-MCA峰至GUDCA峰之间，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率小于等于每分钟0.86%；
在GHDCA峰至iso-DCA峰之间，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率小于等于每分钟7.6%且大于等于每分钟6.8%；
在iso-LCA峰至LCA峰之间，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率在大于等于每分钟25%；
具体洗脱方案为以下方案之一：
方案一、起始流动相中B相的体积比例为26%；第0至7分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为每分钟0.86%，第7分钟流动相中B相体积比例增加至32%；第7至12分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为7.6%，第12分钟升至70%；第12至13分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率等于25%，第13分钟B相体积比例增加至95%；
方案二、起始流动相中B相的体积比例为25%；第0至8分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为每分钟0.75%，第8分钟流动相中B相体积比例增加至31%；第8至12分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为7.25%，第12分钟升至60%；第12至13分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为35%，第13分钟B相体积比例增加至95%；
方案三、起始流动相中B相的体积比例为27%；第0至7分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为每分钟0.57%，第7分钟流动相中B相体积比例增加至31%；第7至12分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为6.8%，第12分钟升至65%；第12至13分钟，流动相中B相体积比例逐渐增加，增加速率为30%，第13分钟B相体积比例增加至95%。
2.如权利要求1所述的含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，A相含有质量分数0.001~0.01%的甲酸或乙酸。
3.如权利要求2所述的含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，A相含有质量分数0.005%的甲酸。
4.如权利要求1所述的含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，B相含有质量分数0.001~0.01%的甲酸。
5.如权利要求4所述的含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，B相含有质量分数0.005%的甲酸。
6.如权利要求1所述的含有同分异构体胆汁酸代谢组分分离方法，其特征在于，柱温在40~50℃之间。
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