[发明专利]肿瘤浸润淋巴细胞在改善乳腺癌中的应用

说明书

本发明公开了一种肿瘤浸润淋巴细胞在改善乳腺癌中的应用,首先从患者体内切除肿瘤；肿瘤组织在无菌、冷链条件下运输至实验室，并分离获得起始肿瘤浸润淋巴细胞，起始肿瘤浸润淋巴细胞在适宜条件下培养、扩增一万倍并进一步纯化，达到10⁸个初代种子细胞，然后进行冻存；肿瘤浸润淋巴细胞复苏、扩增至5×10⁷个，以慢病毒载体RNAi技术敲低PD‑1；肿瘤浸润淋巴细胞进一步扩增至一千至一万倍；最后肿瘤浸润淋巴细胞回输至患者，平均每次注射肿瘤浸润淋巴细胞的细胞量为8.2×10¹⁰个。本发明相较于其它免疫疗法，肿瘤浸润淋巴细胞具有识别肿瘤抗原靶点多、副作用少、可治疗实体瘤多，疗效更强等优点。

技术领域

本发明属于免疫细胞疗法技术领域，具体的说是涉及一种肿瘤浸润淋巴细胞在改善乳腺癌中的应用。

背景技术

女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99％发生在女性，男性仅占1％。乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始一直呈上升趋势。美国8名妇女一生中就会有1人患乳腺癌，中国不是乳腺癌的高发国家，但不宜乐观，近年我国乳腺癌发病率的增长速度却高出高发国家1～2个百分点。据国家癌症中心和卫生部疾病预防控制局2012年公布的2009年乳腺癌发病数据显示：全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位，女性乳腺癌发病率全国合计为42.55/10万，城市为51.91/10万，农村为23.12/10万。

乳腺癌已成为当前社会的重大公共卫生问题，乳腺癌的病因尚未完全清楚，研究发现乳腺癌的发病存在一定的规律性，具有乳腺癌高危因素的女性容易患乳腺癌。所谓高危因素是指与乳腺癌发病有关的各种危险因素，而大多数乳腺癌患者都具有的危险因素就称为乳腺癌的高危因素。据中国肿瘤登记年报显示：女性乳腺癌年龄别发病率0～24岁年龄段处较低水平，25岁后逐渐上升，50～54岁达到高峰，55岁以后逐渐下降。乳腺癌家族史是乳腺癌发生的危险因素，所谓家族史是指一级亲属即母亲、女儿或姐妹中有乳腺癌患者。近年发现乳腺腺体致密也成为乳腺癌的危险因素。乳腺癌的危险因素还有月经初潮早、绝经迟、未婚、未育、晚育、未哺乳、患乳腺良性疾病未及时诊治、经医院活检证实患有乳腺非典型增生、胸部接受过高剂量放射线的照射、长期服用外源性雌激素、绝经后肥胖、长期过量饮酒以及携带与乳腺癌相关的突变基因。具有以上若干项高危因素的女性并不一定患乳腺癌，只能说其患乳腺癌的风险比正常人高，中国妇女乳腺癌的发病率还是低的。

肿瘤免疫治疗，是这几年比较热门，甚至是最热门的癌症治疗手段。说起肿瘤免疫治疗，大家可能立马想到PD-1或PD-L1 抗体，K 药、O 药、国产PD-1 抗体，不少晚期癌症患者可以获益。淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞，其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线士兵。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（T细胞）、B淋巴细胞（B细胞）和自然杀伤细胞(NK细胞)。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。