[发明专利]水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定引物及鉴定方法和应用

权利要求书

1.一种水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定引物，其特征在于，引物序列如下：

正向引物序列“5’-TTTCAGTGTCCTCCTGTCTG-3’”；

反向引物序列“5’-ACCACTAAACCAGGTGCTAC-3’”。

2.一种水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

提取待测种质植株DNA；

加入权利要求1所述的引物进行PCR反应；

PCR反应产物进行琼脂糖凝胶电泳；

条带分析。

3.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，条带分析方法为：观察在151bp和159bp处是否出现特异性条带；如果在159bp处出现特异性条带，则待测种质具有GW8的A等位基因，说明待测种质的粒长较长，粒宽较窄、粒厚较薄；如果在151bp处出现特异性条带，则待测种质具有GW8的B等位基因，说明待测种质的粒长较短，粒宽较宽、粒厚较厚。

4.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，采用CTAB法提取待测种质的幼嫩叶片DNA，所提取的DNA溶解于双蒸水中，4℃保存备用。

5.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，PCR反应体系为：反应体系体积为20μL，其中包括：2×TaqMix buffer10μL，双蒸水6μL，10μm的引物GW8-InDel 2μL，待测样品DNA 2μL。

6.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，PCR反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，54℃退火温度下复性30s，72℃延伸40s，35个循环；72℃延伸10min后4℃保存。

7.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，PCR产物在琼脂糖凝胶电泳上检测，采用1×TAE作为电泳缓冲液，电泳恒定电压为120V，电泳30min后，在凝胶成像系统下观察并拍摄。

8.根据权利要求2所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶包括：琼脂糖9g、1×TAE 300mL、EB染色剂50μL。

9.权利要求1所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定引物在水稻性状鉴定中的应用。

10.根据权利要求9所述的水稻粒型调控基因GW8等位基因的鉴定引物在水稻性状鉴定中的应用，其特征在于，所述水稻性状包括水稻种子粒长、粒宽和粒厚。