[发明专利]膜蛋白AmpG的表达载体及其表达纯化方法有效
| 申请号： | 202010048405.8 | 申请日： | 2020-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN113122558B | 公开（公告）日： | 2023-06-02 |
| 发明（设计）人： | 周敏;张苑桢;陈宇航;卢颖洪 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/65;C12N15/62 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人： | 刘海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 膜蛋白 ampg 表达 载体 及其 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.膜蛋白AmpG的表达载体，其特征在于，为表达质粒pLy077-AmpG，核苷酸序列如SEQID NO.2所示，包含：噬菌体T7启动子；大肠杆菌核糖体结合位点；NcoI序列CCATGG、SEQ IDNO.1所示的大肠杆菌膜蛋白AmpG序列以及BamHI位点GGATCC；烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC；NdeI酶切位点 CATATG；超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列；XhoI酶切位点CTCGAG；6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。
2.根据权利要求1所述的膜蛋白AmpG的表达载体的表达纯化方法，其特征在于，具体步骤如下：
步骤1，大肠杆菌膜蛋白AmpG表达载体突变株的制备：将膜蛋白AmpG的表达载体即表达质粒pLy077-AmpG转化到宿主大肠杆菌中，并涂布于含抗生素以及0.1mM IPTG琼脂平板，挑选黄绿色的阳性单克隆菌进行扩大培养和诱导表达；
步骤2，将挑选的突变菌株转化株接种至培养基中进行扩大培养，并用1mM IPTG大规模诱导表达膜蛋白AmpG。
3.根据权利要求2所述的表达纯化方法，其特征在于，步骤1中，所述的大肠杆菌为大肠杆菌DH5α或大肠杆菌BL21(DE3)。
4.根据权利要求2所述的表达纯化方法，其特征在于，步骤2中，所述的培养基为LB培养基或TB培养基。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京理工大学，未经南京理工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010048405.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
