[发明专利]一种白花虎眼万年青同源结构域转录因子OtPHD1基因及应用有效
| 申请号： | 202010053264.9 | 申请日： | 2020-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN111118027B | 公开（公告）日： | 2022-07-29 |
| 发明（设计）人： | 姜福星;黄远祥;周鹏;何伟;李西;孙大江 | 申请（专利权）人： | 四川天艺优境环境科技有限公司;四川农业大学;四川天艺生态园林集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N5/10;A01H6/00 |
| 代理公司： | 成都天汇致远知识产权代理事务所(普通合伙) 51264 | 代理人： | 韩晓银 |
| 地址： | 610093 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 白花 万年青 同源 结构 转录 因子 otphd1 基因 应用 | ||
1.一种白花虎眼万年青同源结构域转录因子Ot PHD1基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述的白花虎眼万年青同源结构域转录因子Ot PHD1基因编码的蛋白，其氨基酸如SEQ ID NO.2所示。
3.一种含有权利要求1所述的白花虎眼万年青同源结构域转录因子Ot PHD1基因的表达载体。
4.一种白花虎眼万年青同源结构域转录因子Ot PHD1基因的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、在无菌的超净工作台上，剪取白花虎眼万年青的离体叶片，放到含有细胞分裂素6BA的培养基上进行离体培养和珠芽的诱导；
步骤2、待白花虎眼万年青的离体叶片上产生珠芽后，剪取珠芽并提取其RNA，并反转录获得cDNA模板；
步骤3、对cDNA模板进行PCR扩增，获得Ot PHD1基因编码区PCR产物；所述PCR扩增的引物包括Ot PHD1F和Ot PHD1 R，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；对OtPHD1基因编码区PCR产物连接到T载体中，将其转入大肠杆菌感受态中，涂布平板，37℃倒置培养后挑取单克隆进行PCR鉴定及测序，得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Ot PHD1基因，其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.一种权利要求3所述的表达载体的构建方法，其特征在于，该方法中用到的无缝连接引物包括XbaIOt PHD1F和KpnIOt PHD1R；其核苷酸序列分别如SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示。
6.权利要求1所述的白花虎眼万年青同源结构域转录因子Ot PHD1基因在分子水平提高植物对盐碱非生物胁迫的抗性育种中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述植物为鳞茎球根花卉。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述鳞茎球根花卉为白花虎眼万年青。
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