[发明专利]用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探针组合物，其特征在于，包括：检测人ADD3基因甲基化的第一特异性引物及第一特异性探针，检测人CDH23基因甲基化的第二特异性引物及第二特异性探针，检测内参基因β-actin的第三特异性引物及第三特异性探针；

所述第一特异性引物的正向引物如SEQ NO.1所示核苷酸序列，所述第一特异性引物的反向引物如SEQ NO.2所示核苷酸序列，所述第一特异性探针如SEQ NO.3所示核苷酸序列；

所述第二特异性引物的正向引物如SEQ NO.4所示核苷酸序列，所述第二特异性引物的反向引物如SEQ NO.5所示核苷酸序列，所述第二特异性探针如SEQ NO.6所示核苷酸序列；

所述第三特异性引物的正向引物如SEQ NO.7所示核苷酸序列，所述第三特异性引物的反向引物如SEQ NO.8所示核苷酸序列，所述第三特异性探针如SEQ NO.9所示核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述第一特异性探针与第二特异性探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；所述荧光报告基团选自FAM、HEX、TET、JOE、NED、VIC、CY3、CY5、ROX或TAMRA中的任意一种，所述荧光淬灭基团选自MGB、BHQ或Phosphorothioate中的任意一种。

3.一种用于检测人ADD3和CDH23基因甲基化的试剂盒，其特征在于，包括采用如权利要求1或者2所述的引物探针组合物所组成的引物探针预混液，扩增预混液，阴性质控品及阳性质控品；

所述扩增预混液由PCR缓冲液、PCR保护剂、Taq酶、dNTPs、MgCl₂组成；

所述阳性质控品为亚硫酸氢盐修饰的全甲基化人类基因组DNA；

所述阴性质控品为亚硫酸氢盐修饰的非甲基化人类基因组DNA。