[发明专利]一种雷西纳德和主要杂质进行有效分离的检测方法

说明书

本发明涉及一种雷西纳德和主要杂质进行有效分离的检测方法。所述的检测方法包括使用高效液相色谱法检测雷西纳德样品中与主峰极性接近的杂质，特别是杂质2‑((5‑氯‑4‑(4‑环丙基‑1‑萘)‑4H‑1,2,4‑三唑‑3‑基)硫代)乙酸能和主峰进行有效分离的方法。在实际检测过程中，本方法的检测限达0.019μg/ml，以及能有效分离极性接近杂质，实用性强，检测过程简单、快捷。

技术领域

本发明涉及一种雷西纳德和主要杂质进行有效分离的检测方法，属于医药生物技术领域。

背景技术

雷西纳德(Lesinurad)，化学名为2-((5-溴-4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸。雷西纳德是一种新型治疗痛风的药物，其通过抑制尿酸盐转运蛋白1，促进尿酸排泄而降低尿酸水平。临床研究显示，雷西纳德耐受性较好，且可剂量相关性地降低血浆中的尿酸水平，将其与黄嘌呤氧化酶抑制剂(别嘌呤醇和非布索坦)联用，可提高对上述药物应答不佳的痛风患者的应答率，可有效加速痛风患者的尿酸消除，且具有较高安全性，市场前景良好。雷西纳德的化学结构式为：

雷西纳德的绝对生物利用度是约100％。口服给药后雷西纳德被迅速地吸收。给予单剂量ZURAMPIC片或在食物中或空腹状态后，在1至4小时内达到峰浓度(C_max)。用单剂量ZURAMPIC从5至1200mg时，雷西纳德的C_max和AUC暴露正比例地增加。

雷西纳德的合成主要是通过2-((5-溴-4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸甲酯的水解合成制备得到，但由于其一中间体2-((4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸甲酯使用NBS进行溴代时在水解阶段容易产生氯代杂质(杂质Ⅰ)，因而2-((5-溴-4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸甲酯的质量基本决定了雷西纳德的质量。

经文献检索，有文献报道了雷西纳德的检测方法，主要制订了一个杂质，包括2-((5-氯-4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸(杂质Ⅰ)。

由于合成样品中主要存在的杂质与雷西纳德极性相近易包裹在主峰中，要达到完全的基线分离，采用文献报道的高效液相色谱法或在上述方法基础上的优化方法，则雷西纳德和杂质Ⅰ未能达到一定的分离度。为确保临床用药的安全有效，有必要建立一种新的有效分离上述杂质的检测方法。

在实际临床领域中，药品在临床使用过程中产生的不良反应，除了与药品主要成分的药理活性有关外，还与药品中存在的杂质有关联，在临床实践中，不良反应有可能由药品杂质产生，因此，为不断提高雷西纳德的安全性和有效性，本发明建立了一种能有效分离检测雷西纳德中可能存在的杂质方法。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供了一种雷西纳德和主要杂质进行有效分离的检测方法，能够对雷西纳德中可能存在的杂质Ⅰ进行有效分离并进行定量检测，进一步提高雷西纳德的安全性和有效性。

本发明采取的技术方案如下：

一种雷西纳德和主要杂质进行有效分离的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法，所述检测方法包括以下步骤：

S1、配制流动相：

流动相A：磷酸盐缓冲液；

流动相B：甲醇；

S2、制备供试品溶液：称取雷西纳德样品，加乙腈配制成供试品溶液，待用；

S3、制备混合对照品溶液：称取杂质Ⅰ对照品，加入雷西纳德样品，加乙腈配制成混合对照品溶液，待用；所述杂质I为2-((5-氯-4-(4-环丙基-1-萘)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)乙酸；