[发明专利]基于血清糖蛋白糖型评估乳腺癌化疗效果的标志物及其应用

说明书

本发明提供了一种基于血清糖蛋白糖型评估乳腺癌化疗效果的标志物及其应用。通过检测凝集素LCA、GSL‑II、GSL‑I、PHA‑E+L、WFA、RCA120中任一或任意组合所识别糖链的表达水平，能够评估化疗对乳腺癌化疗后患者是否有疗效。具体依据可参考：GSL‑II下调，且下调的Fold‑change值在0.5‑1.9之间；LCA，GSL‑I，RCA120上调，且上调的Fold‑change值在1.68‑2.4，3‑12.5，0.67‑2.61之间；PHA‑E+L、WFA与健康女性对照组无显著性差异，则说明有疗效。

技术领域

本发明涉及一种基于血清糖蛋白糖型检测的乳腺癌化疗效果标志物及其应用。

背景技术

乳腺癌是妇女中最常见的恶性肿瘤，也是女性中癌症死亡的主要原因，在世界范围内，其发病率和死亡率预计在今后5至10年内将显著增加。乳腺癌的发病率之高，严重危害了女性的健康。根据最新几年的统计数据显示，中国女性整体上乳腺癌的发病率和死亡率呈现上升的趋势，同时乳腺癌患者出现了年轻化、死亡率升高的趋势。乳腺癌的治疗通常涉及手术治疗、化学药物治疗、放射性治疗、内分泌治疗和靶向治疗。新辅助化疗已经成为治疗乳腺癌的最佳方案之一，可以提高患者生存质量，改善临床症状，延长患者生存期。目前，临床上对乳腺癌新辅助化疗的疗效评价主要通过临床评价和病理组织学评价。但仍有疗效评估出现偏差以及获得疗效结论较晚、错失调整化疗最佳方案等局限性。因此，早期诊断及评估对于改善预后、延长患者生存期具有重要意义。另一方面，我国人口基数庞大、地区差异明显，采用更为简便、经济的方法进行早期诊断和早期治疗，可避免化疗盲目性。

长期以来，组织活检技术常作为肿瘤诊断的金标准，随着对肿瘤研究的深入发现组织活检技术仍有肿瘤异质性、不适用于所有患者等局限性。但随着液体活检技术的出现，不仅解决了组织活检的局限性问题，同时也缩短了癌症的诊断时间，液体活检就是通过检测血液或者尿液等体液中的某些生物活性分子，从而对癌症等疾病做出诊断。其优势在于能通过非侵入性取样降低活检的危害；由于其具有敏感性高、检测快捷等特点，并且有利于肿瘤的早期发现，已有研究指出，同健康女性血清相比，乳腺癌患者血清中可检测到不同浓度的HER2，VEGF和EGF蛋白等具有乳腺癌诊断潜能的血清标志物。同时，血清中疾病特异性的标志物在肺癌、结直肠癌、胃癌、肝癌、宫颈癌等领域也得到了广泛关注和应用。

蛋白质糖基化在癌症方面的研究日益兴起，越来越多的证据表明，糖基化异常与肿瘤细胞的侵袭和转移有密切关系，这些变化包括糖链在表达水平上的差异和特殊糖基结构的出现。糖链是膜蛋白和分泌蛋白的结构组分，通过糖基化作用影响蛋白质的功能，与细胞通讯、信号转导等密切相关，糖链的改变往往是对机体状态变化更灵敏的应答。因此研究糖复合物糖基化将有望提高标志物的特异性与灵敏度，为癌症早期发现、诊断、预后及化疗疗效评估提供新的方法。

而诸多研究表明，在乳腺癌及其他多种癌症患者血清中可见肿瘤相关性糖基化的改变。乳腺癌患者血清中蛋白质糖基化修饰存在差异，具体表现为增多的MUC型O-糖链、含多聚N-乙酰乳糖胺(poly-LacNAc)结构的糖链、分支型N-糖链，减少的β1-4GlcNAc等分型和拥有LacdiNAc末端结构的复杂型N-糖链，以及糖链岩藻糖基化、唾液酸化修饰增加等；转移性乳腺癌患者化疗前后血清唾液酸转移酶(Serum sialyltransferas，SST)平均水平在进展期乳腺癌患者中显著升高，乳腺癌患者N-糖链的高甘露糖修饰水平与正常人血清中甘露糖修饰水平相比明显增加。

凝集素是一类糖结合蛋白，其可识别不同的糖链结构并以多价形式与这些糖链特异性结合。通过将凝集素探针固定于经环氧化修饰的固体片基上制成凝集素芯片，凭借生物芯片便捷、快速和高通量的优势，人们便可获得临床样本中糖复合物糖基化相关信息，发现与疾病特异性相关的差异性表达的糖链。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过血清中糖蛋白糖链的变化来评估乳腺癌化疗疗效的方案。

本发明给出的方案如下：