[发明专利]异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母及构建方法

权利要求书

1.异源合成β-香树脂醇的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：向解脂耶氏酵母中导入优化后的β-香树脂醇合酶编码基因，得到重组菌1；

所述优化后的β-香树脂醇合酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向解脂耶氏酵母中导入优化后的β-香树脂醇合酶编码基因、优化后的齐墩果酸合酶编码基因和优化后的细胞色素-NADPH-还原酶1的编码基因，得到重组菌2；

所述优化后的β-香树脂醇合酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述优化后的齐墩果酸合酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述优化后的细胞色素-NADPH-还原酶1的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的编码基因HMG1，得到重组菌3。

所述3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的编码基因HMG1如SEQ ID NO.4所示。

4.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

(1)将编码3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因HMG1的5'端的核苷酸去除1500个，得到截短的编码3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因tHMG1；

所述3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的的编码基因HMG1的核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示；所述截短的编码3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因tHMG1的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

(2)将截短的编码3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因导入重组菌2中，得到重组菌4。

5.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入氧化鲨烯环化酶的编码基因ERG1，得到重组菌5；

所述氧化鲨烯环化酶的编码基因ERG1如SEQ ID NO.6所示。

6.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入磷酸甲羟戊酸激酶的编码基因ERG8，得到重组菌6；

所述磷酸甲羟戊酸激酶的编码基因ERG8如SEQ ID NO.7所示。

7.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入鲨烯合酶的编码基因ERG9，得到重组菌7；

所述鲨烯合酶的编码基因ERG9如SEQ ID NO.8所示。

8.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入乙酰乙酰辅酶A硫解酶的编码基因ERG10，得到重组菌8；

所述乙酰乙酰辅酶A硫解酶的编码基因ERG10如SEQ ID NO.9所示。

9.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入甲羟戊酸激酶的编码基因ERG12的表达盒，得到重组菌9；

所述甲羟戊酸激酶的编码基因ERG12如SEQ ID NO.10所示。

10.异源合成β-香树脂醇和齐墩果酸的重组解脂耶氏酵母的构建方法，其特征是包括如下步骤：

向重组菌2中导入甲羟戊酸二磷酸脱羧酶的编码基因ERG19，得到重组菌10；

所述甲羟戊酸二磷酸脱羧酶的编码基因ERG19如SEQ ID NO.11所示。