[发明专利]SCAD重组腺病毒载体质粒、SCAD重组腺病毒及其构建方法和应用在审
申请号: | 202010061445.6 | 申请日: | 2020-01-19 |
公开(公告)号: | CN111139265A | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 周四桂;苏永少;廖英勤;钟小艺;冯静韵 | 申请(专利权)人: | 广东药科大学 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/66;C12N15/53;A61K48/00;A61K38/44;A61P9/04;A61P9/00 |
代理公司: | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 | 代理人: | 喻振兴 |
地址: | 512000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | scad 重组 病毒 载体 质粒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种SCAD重组腺病毒载体质粒,其特征在于,是将SCAD蛋白编码基因重组至pHBAd-MCMV-GFP载体得到的pHBAd-MCMV-GFP-SCAD,所述SCAD重组腺病毒载体质粒的序列如SEQID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的SCAD重组腺病毒载体质粒的构建方法,其特征在于,其是经Not I和EcoR I双酶切的pHBAd-MCMV-GFP载体与SCAD蛋白编码基因连接、转化后构建而成。
3.根据权利要求2所述的SCAD重组腺病毒载体质粒的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、设计SCAD蛋白编码基因的引物如下:
SCADS-EcoR I-F:acacgaattcgccaccATGGCCATGGCCGCTGCGT,
SCADS-NotI-R:acacgcggccgcTCAGCTCCGGTAGCTCCGGA;
S2、以含有SCAD蛋白编码基因的RNA逆转录后作为模板,用所述引物和DNA聚合酶进行聚合酶链式反应扩增,纯化,得到扩增产物;
S3、将pHBAd-MCMV-GFP载体用Not I和EcoR I双酶切,酶切完成后,胶回收纯化;
S4、将步骤S2得到的扩增产物和步骤S3经过双酶切的载体用T4连接酶进行连接,然后用感受态细胞进行转化和培养、提取,即可得到重组腺病毒载体质粒pHBAd-MCMV-GFP-SCAD。
4.根据权利要求3所述的SCAD重组腺病毒载体质粒的构建方法,其特征在于,所述的步骤S4中,感受态细胞为DH5α细胞。
5.一种SCAD重组腺病毒,其特征在于,是由权利要求1所述的SCAD重组腺病毒载体质粒和骨架质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒Ad-SCAD。
6.根据权利要求5所述的SCAD重组腺病毒,其特征在于,所述的骨架质粒为pHBAd-BHG。
7.根据权利要求5所述的SCAD重组腺病毒,其特征在于,所述的转染HEK293细胞所用的转染试剂为LipofiterTM。
8.根据权利要求5~7任一项所述的SCAD重组腺病毒在制备预防、缓解和/或治疗病理性心肌肥厚、心肌纤维化及心力衰竭的药物中的应用。
9.根据权利要求5~7任一项所述的SCAD重组腺病毒在制备抑制或治疗心血管系统疾病的药物中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广东药科大学,未经广东药科大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010061445.6/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。