[发明专利]一种羧状菌EO-08及其降解环氧乙烷的应用

说明书

本发明公开了一种羧状菌EO‑08及其降解环氧乙烷的应用，涉及环氧乙烷处理技术中的生物降解技术领域。羧状菌EO‑08 Clostridium kogasensis保藏编号为CGMCC No.18438。本发明还公开了羧状菌EO‑08的应用。本发明解决了工业环氧乙烷后处理措施中的污水处理排放问题，有效地筛选出了降解环氧乙烷的微生物，提高了降解菌的降解效果。EO‑08在30％碳源条件下，能够降解400mg/L浓度的环氧乙烷，环氧乙烷降解率可达83.61％；在30％碳源条件下，能够降解800mg/L高浓度的环氧乙烷，环氧乙烷降解率可达91.70％。

技术领域

本发明涉及环氧乙烷处理技术中的生物降解技术领域，特别是涉及处理溶解于液体中环氧乙烷降解菌的筛选及应用技术领域，更具体的说是涉及一种羧状菌EO-08及其降解环氧乙烷的应用。

背景技术

目前，环氧乙烷是现代化工领域重要石化产品之一。由于环氧乙烷分子量小、穿透性高且能与DNA、蛋白质等生物大分子发生偶联化合反应，决定了它在医学灭菌行业有着无法替代的地位。另外，环氧乙烷灭菌成本低，能进行工业级大规模灭菌处理，是至今为止最重要的低温灭菌剂之一。不过，环氧乙烷性质极其活泼，易燃易爆同时也是世界公认致癌物质，所以增大了环氧乙烷在应用上的壁垒。

目前，工业灭菌处理环氧乙烷的方法主要有两种：一种是利用硫酸作为反应底物进行中和反应，该项技术弊端是有吸收饱和度较小，并且会产生难以处理的副产物增大处理成本。另外一种是利用氧化反应炉进行氧化反应，这种技术对技术参数控制要求非常高，而且处理过程容易发生爆炸。

微生物降解是一种可能的解决途径，但是，作为杀菌剂，环氧乙烷对生物毒性大，并且微生物降解池微环境非常复杂，并且受到很多因素影响。

因此，发明一种对环氧乙烷处理能力强且更加环保处理过程，扩大其在工业灭菌、医学灭菌领域的使用范围与利用率是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种羧状菌EO-08及其降解环氧乙烷的应用。解决了工业环氧乙烷后处理措施中的污水处理排放问题，有效地筛选出了降解环氧乙烷的微生物，提高了降解菌的降解效果。筛选出能在复杂的污水环境下保持降解活性的微生物。

环氧乙烷降解菌：羧状菌Clostridium kogasensis，属于革兰氏阴性菌，命名为EO-08，于2019年8月29日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号No.18438，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种羧状菌Clostridium kogasensis EO-08，保藏编号为CGMCC No.18438。

本发明还提供了一种可降解环氧乙烷菌种的驯化方法，包括下列步骤：

(21)菌种环氧乙烷耐受力驯化：将具有环氧乙烷降解潜力的原始菌种依次传代划线于含有不同环氧乙烷浓度的环氧乙烷耐受驯化培养基平板上，37℃恒温厌氧培养24～48h；在最终含500～800mg/L环氧乙烷耐受驯化培养基平板上挑选菌落半径最大的单菌落；

(22)菌种环氧乙烷降解力驯化：将步骤(21)中筛选出的最大的单菌落菌依次传代划线于含500～800mg/L环氧乙烷且含不同比例碳源的环氧乙烷降解能力驯化培养基，进行环氧乙烷降解能力驯化；在最终500～800mg/L，30％的碳源的环氧乙烷降解能力驯化培养基，挑选菌落半径最大的单菌落即得可降解环氧乙烷的菌种。

优选的：步骤(21)不同环氧乙烷浓度：逐渐升高，20～800mg/L。