[发明专利]5%低浓度人血白蛋白的制备方法

说明书

本发明公开了一种5％低浓度人血白蛋白的制备方法，包括以下步骤：(1)准备配制用溶液；(2)溶解；(3)精制；(4)过滤；(5)超滤；(6)配制；(7)灭活分装。目前国内没有5％低浓度人血白蛋白上市，本发明筛选出三种5％低浓度人血白蛋白处方：(1)3～8mmol/L甘氨酸+0.140～0.180mmol/g辛酸钠+110～140mmol/L氯化钠；(2)0.140～0.180mmol/g辛酸钠+110～140mmol/L氯化钠；(3)0.064～0.096mmol/g乙酰色氨酸+0.064～0.096mmol/g辛酸钠+110～140mmol/L氯化钠；同时还增加了含有甘氨酸的处方，更利于提高稳定性。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，特别是涉及一种低浓度人血白蛋白的制备方法。

背景技术

人血白蛋白制剂是从健康人血浆中分离提纯的蛋白产品，是一种广泛应用与烧伤、创伤以及腹水等疾病的药品，目前国内市场上主要有25％、20％、10％浓度的白蛋白溶液，但还没有厂家上市5％浓度的白蛋白溶液。在某些疾病如腹水等的临床应用时，可直接使用25％、20％、10％浓度的白蛋白溶液，但是在一些情况下如只需补充白蛋白时，则常常需要将白蛋白的浓度稀释到与健康人血浆中白蛋白浓度一致，在高浓度白蛋白稀释成低浓度白蛋白时，由于白蛋白不稳定，很容易产生沉淀或白点状物质，且低浓度白蛋白在存放过程中易形成多聚体，影响产品的质量。

健康人血浆中白蛋白的浓度为38～48g/L，5％浓度的人血白蛋白浓度与健康人血浆中白蛋白浓度非常接近，因此5％浓度白蛋白制品也被称为等渗产品，在临床上可以直接输注。开发5％浓度的白蛋白产品不仅有利于丰富市场产品种类，提高低浓度产品安全性，也使临床使用更便利。

发明内容

针对以上现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种能够在临床上直接输注的5％低浓度人血白蛋白的制备方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：

一种5％低浓度人血白蛋白的制备方法，包括以下步骤：

S1-准备配制用溶液：配制用溶液包括缓冲液和处方配制用溶液，其中，缓冲液包括0.5mol/L醋酸溶液和0.5mol/L氢氧化钠溶液，处方配制用溶液包括乙酰色氨酸配制成0.5mol/L溶液，调整pH为6.80±0.20，甘氨酸配制成 1.0mol/L溶液，辛酸钠配制成0.1mol/L溶液，氯化钠配制成2.0mol/L溶液；

S2-溶解：取原料血浆通过低温乙醇法纯化分离，然后进行组分V沉淀，得到的沉淀物再用3倍沉淀量的注射用水溶解4小时；

S3-精制：用缓冲液调整制品PH至4.50，添加低温乙醇至制品中，使乙醇含量为10.0％，同时降低温度至-3℃，搅拌反应2小时，再静置5小时；

S4-过滤：用滤堆对制品进行过滤，过滤结束后用缓冲液调整制品pH至7.0；

S5-超滤：用超滤膜包浓缩蛋白浓度至8％，再用等体积15倍以上的注射用水进行超滤透析，透析结束后，浓缩蛋白浓度至8％；

S6-配制：加入处方配制用溶液，按照蛋白浓度50g/L、氯化钠110～ 140mmol/L、辛酸钠0.140～0.180mmol/g蛋白、pH6.40～7.40配制制品；

S7-灭活分装：将调整好的制品在搅拌状态下在60℃条件下恒温600分钟以上，然后通过终端为0.2μm的滤芯除菌过滤灌装，灌装后对制品进行外观及可见异物检查。

作为本发明的另一种实施方式，所述步骤S6中，加入处方配制用溶液，按照蛋白浓度50g/L、氯化钠110～140mmol/L、辛酸钠0.140～0.180mmol/g蛋白、甘氨酸3～8mmol/L、pH6.40～7.40配制制品。