[发明专利]一株可改善上呼吸道感染症的鼠李糖乳杆菌Probio-M9及其应用

说明书

本申请公开了一株可改善上呼吸道感染症的鼠李糖乳杆菌Probio‑M9及其应用。本申请以鼠李糖乳杆菌Probio‑M9为研究对象，选择志愿者91人，随机分为益生菌组和安慰剂组进行为期6周的干预试验，并每周对志愿者进行一次调查随访。实验证明，鼠李糖乳杆菌Probio‑M9可改善成人在流感高发季节上呼吸道感染的症状并缩短症状持续时间。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，特别涉及一株可改善上呼吸道感染症的鼠李糖乳杆菌Probio-M9及其应用。

背景技术

流感有季节性流行和流感大流行之分。季节性流感指的是每年冬春季节发生的流感，主要因流感病毒发生小的变异所致。流感大流行是指当流感病毒发生突变，人类对其缺乏免疫能力，从而引发全球范围内流行。患流感的几率在一定程度上取决于每个人免疫系统的强弱。

上呼吸道感染是常见病、多发病，是包括鼻腔、咽或喉部急性炎症的总称。广义的上呼吸道感染不是一个疾病诊断，而是一组疾病，包括普通感冒、病毒性咽炎、喉炎、疱疹性咽峡炎等；狭义的上感又称普通感冒，是最常见的急性呼吸道感染性疾病，多呈自限性，但发生率较高，其发病率历年都高于其他病种。成人每年发生2-4次，儿童发生率更高，每年6-8次，全年皆可发病，冬春季较多。

目前，成人或儿童预防或治疗上呼吸道感染通常采用注射或口服给药的方式，但这些方式在预防和治疗过程中会对病人造成给药痛苦以及疼痛，尤其儿童因为害怕疼痛以及厌恶药的味道对注射以及口服给药的方式配合度很低，治疗效果受到影响。因此，缺少一种高效、安全、无毒副作用的可改善成人流感季节上呼吸道感染症状的益生菌。

发明内容

本申请的目的之一在于提供一株可改善上呼吸道感染症的鼠李糖乳杆菌Probio-M9。

本申请的目的之二在于提供鼠李糖乳杆菌Probio-M9在改善上呼吸道感染症的应用。

进一步地，所述鼠李糖乳杆菌Probio-M9在发酵剂或添加的发酵乳、健康食品以及动物保健制品中的应用。

本申请的鼠李糖乳杆菌Probio-M9是通过以下技术方案实现的：

本申请所述鼠李糖乳杆菌Probio-M9是从中国内蒙古、新疆、湖北、北京等地区100份健康妇女母乳样中分离得到的540株乳酸菌和双歧杆菌中筛选出的一株具有潜在益生特性的益生菌。具体地，通过以下分离方法得到的：

步骤1：将采集到的100份健康妇女的母乳样品进行倍比稀释，得到10^-1-10^-2稀释梯度，吸取各梯度母乳样品200μL均匀涂布于MRS固体培养基平皿内，37℃厌氧培养48-72h；

所述MRS培养基的组成有大豆蛋白胨10g、牛肉膏5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、Tween80 1ml、磷酸二氢钠2g、无水乙酸钠5g、柠檬酸三胺2g、硫酸锰0.02g、硫酸镁0.1g，蒸馏水1L，调节pH至6.2左右，琼脂15g，121℃、15min灭菌。

步骤2：挑取形态、大小、颜色不同的单克隆接种于液体培养基中，于37℃恒温培养箱培养24h；

步骤3：待菌株生长良好后，进行革兰氏染色、镜检。保存分离株，并提取菌株基因组DNA用于后续测定分析；

步骤4：将冷冻保存的供试菌株接种于TPY增菌液体培养基中，于30℃恒温培养24h，经TPY传代培养2-3代后，取2mL对数生长末期的菌体培养物置于无菌EP管内离心，经8000×g离心3min(4℃)后收集菌体，弃上清；

所述TPY增菌培养液的组成有乳糖10g、牛肉膏5g、酵母粉5g、酪蛋白胨10g、大豆蛋白胨5g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸二氢钾2.5g、硫酸镁0.1g、吐温80 0.25g、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g、15g琼脂、蒸馏水1L，121℃、15min灭菌。