[发明专利]一种黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶和苦茶生物碱theacrine的制备方法有效
| 申请号： | 202010071826.2 | 申请日： | 2020-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN111218435B | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 何蓉蓉;胡丹;张志民;张月虹;段文君;龚海标;李怡芳;栗原博 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12P17/18 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 许庆胜 |
| 地址： | 510000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄嘌呤 生物碱 甲基转移酶 theacrine 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组蛋白，其特征在于，其氨基酸序列为：
如SEQ ID No：1、SEQ ID No：2或SEQ ID No：3所示的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述重组蛋白的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列为选自SEQ IDNo：5、SEQ ID No：6或SEQ ID No：7的核苷酸序列。
3.一种表达载体，其特征在于，包括权利要求2所述的核苷酸。
4.权利要求1所述重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
构建权利要求3所述的表达载体，将所述表达载体导入宿主细胞中，诱导表达，再通过分离纯化获得所述重组蛋白。
5.权利要求1所述重组蛋白作为黄嘌呤生物碱9-N-甲基转移酶的应用。
6.一种苦茶生物碱theacrine的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将1,3,7-三甲基尿酸和甲基供体在权利要求1所述重组蛋白的催化下进行酶促反应，得到苦茶生物碱theacrine。
7.权利要求6所述苦茶生物碱theacrine的制备方法，其特征在于，所述甲基供体为S-腺苷甲硫氨酸；
所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示。
8.根据权利要求6所述苦茶生物碱theacrine的制备方法，其特征在于，所述酶促反应的pH值为6.5~7。
9.根据权利要求6所述苦茶生物碱theacrine的制备方法，其特征在于，所述酶促反应的温度为30℃~37℃。
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