[发明专利]小麦单倍体诱导基因及其应用有效
申请号: | 202010074738.8 | 申请日: | 2020-01-22 |
公开(公告)号: | CN111073875B | 公开(公告)日: | 2022-01-25 |
发明(设计)人: | 陈绍江;刘晨旭;钟裕;祁晓龙;刘宗凯 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/46;A01H1/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100193 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 单倍体 诱导 基因 及其 应用 | ||
1.一种小麦母本单倍体诱导系的制备方法,包括如下步骤:沉默或抑制目的小麦基因组中PLA基因的表达和/或活性或敲除PLA基因,得到转基因小麦,即为小麦母本单倍体诱导系;
所述PLA基因为小麦A基因组中的PLA-A基因和小麦D基因组中的PLA-D基因;
或,所述PLA基因为小麦A基因组中的PLA-A基因和小麦B基因组中的PLA-B基因和小麦D基因组中的PLA-D基因;
所述PLA-A基因、所述PLA-B基因和所述PLA-D基因的基因组序列分别如序列表中序列1、序列4和序列7所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述沉默或抑制目的小麦基因组中PLA基因的表达和/或活性或敲除PLA基因为突变目的小麦基因组中PLA基因使目的小麦基因组中PLA基因表达量降低或使目的小麦基因组中PLA基因发生缺失突变或插入突变或碱基替换。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述使目的小麦基因组中PLA基因发生缺失突变或插入突变或碱基替换的方式为CRISPR/Cas9。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述CRISPR/Cas9的靶序列为序列1第905-923位和序列7第939-957位;
或,所述CRISPR/Cas9的靶序列为序列1第699-718位。
5.一种小麦母本单倍体的制备方法,包括如下步骤:将由权利要求1-4任一所述的方法制备的小麦母本单倍体诱导系或其后代进行自交或者作为父本与其他小麦材料杂交,得到自交后代或杂交后代,即为所述小麦母本单倍体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述方法还包括如下步骤:将所述自交后代或所述杂交后代单株进行单倍体性状鉴定和/或叶片倍性鉴定和/或分子鉴定,选取至少一种方法鉴定为单倍体的后代单株为小麦母本单倍体。
7.如下1)-3)任一种应用:
1)由权利要求1-4任一所述的方法制备的小麦母本单倍体诱导系在制备小麦母本单倍体中的应用;
2)沉默或抑制目的小麦基因组中PLA基因的表达和/或活性或敲除PLA基因的物质在制备小麦母本单倍体诱导系或小麦母本单倍体中的应用;
3)由权利要求1-4任一所述的方法制备的小麦母本单倍体诱导系或由权利要求5或6所述的方法制备的小麦母本单倍体在小麦杂交种选育或小麦单倍体育种中的应用。
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