[发明专利]卵泡颗粒细胞近红外荧光探针Nirova-2及其制备方法和应用在审
申请号: | 202010077195.5 | 申请日: | 2020-01-24 |
公开(公告)号: | CN111053922A | 公开(公告)日: | 2020-04-24 |
发明(设计)人: | 张凡;冯异;朱昕燕 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | A61K49/00 | 分类号: | A61K49/00 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;陆尤 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 卵泡 颗粒 细胞 红外 荧光 探针 nirova 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种泡颗粒细胞靶向的荧光探针,其特征在于,是由有机小分子近红外染料IR800CW与人促卵泡激素FSH连接形成的荧光染料-人促卵泡激偶联素复合体,记为荧光探针Nirova-2;其化学结构式为:
。
2.一种如权利要求1所述的卵泡颗粒细胞近红外荧光探针探针的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:
称取FSH充分溶解于磷酸盐缓冲溶液中,同时称取IR800 CW溶于二甲亚砜后用反应溶液体系进行稀释,在温度4℃-37℃条件下加入FSH溶液,搅拌反应20-30h;然后提纯,去除未反应的IR800 CW及过量磷酸盐,冻干,即得到卵泡颗粒细胞近红外荧光探针Nirova-2。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述FSH原料选自:重组人促卵泡激素α、重组人促卵泡激素β、重组人促卵泡激素、尿促卵泡激素、垂体提纯人促卵泡激素。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述还原剂选自二硫苏糖醇、抗坏血酸、三(2-羧乙基)膦。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述反应溶液体系包括磷酸盐缓冲液、生理盐水、超纯蒸馏水;搅拌速度100-300转/分钟。
6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,为了保证FSH的反应效率,投料时加入过量的IR800 CW,反应结束后进行提纯,提纯方法为使用3kDa的超滤管进行分离提纯,或者采用孔径适当的透析袋进行透析提纯。
7.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,为了便于后续储存、运输及使用,将75IU的荧光探针Nirova-2溶液封装于一次使用型玻璃瓶中,利用冷冻干燥机对该荧光探针溶液进行冻干而得到粉体,避光保存。
8.如权利要求1所述的卵泡颗粒细胞近红外荧光探针作为卵巢内卵泡颗粒细胞的近红外荧光标记的应用。
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