[发明专利]中药蜥蜴及其伪品石龙子的鉴别方法

说明书

本发明涉及一种中药蜥蜴及其伪品石龙子的鉴别方法，该方法采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法（Native‑PAGE），结果显示10批蜥蜴样品的3条共有谱带中的1条是区别于石龙子的特征谱带（R_f值为0.37），3批石龙子样品的7条共有谱带中有3条特征谱带（R_f值分别为0.30，0.64，0.77），二者特征谱带位置差别很大，对蛋白谱带进行遗传距离聚类分析，也表明Native‑PAGE法可以将两种药材聚为两类，可作为中药蜥蜴与其伪品石龙子的快速定性鉴别方法，该方法准确性高，重现性好。

技术领域

本发明涉及一种动物类药材的鉴别方法，具体而言，是一种中药蜥蜴及其伪品石龙子的鉴别方法。

背景技术

蜥蜴（Eremias）始载于《神农本草经》，别名马蛇子、麻蛇子、麻蜥等，现收录于《中药大辞典》、《全国中草药汇编》、《北京市中药材标准》、《吉林中草药》和《山西省中药材标准》等，为蜥蜴科动物丽斑麻蜥Eremias argus Peters或华北麻蜥Eremias brenchleyiGuenther的干燥全体，味咸，性寒，有小毒，归肺、肝经，具有破结利水、消瘿散结的功效。现代药理学研究表明，蜥蜴可用于慢性萎缩性胃炎、乙型肝炎、结核病等疾病的治疗，对胃癌、肝癌、食管癌等多种恶性肿瘤有明显疗效。

蜥蜴属于动物类冷背药材，资源有限、价格昂贵，本课题组在前期蜥蜴对照药材研究工作中发现，市场上出现大量蜥蜴伪品石龙子，石龙子价格只有蜥蜴价格的十分之一。虽然在《山西省中药材标准》规定了蜥蜴的性状、显微、水分、浸出物等定性鉴别项目，但是此类药材常以粉末形式入药，药材的外部形态被破坏导致鉴定困难，查阅相关文献发现缺乏对其具有针对性、专属性的鉴定方式与手段。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种中药蜥蜴及其伪品石龙子的鉴别方法，该方法准确性高、重现性好，可以对蜥蜴及其伪品石龙子进行有效鉴别。

为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种中药蜥蜴及其伪品石龙子的鉴别方法，包括步骤：

精密称取每批蜥蜴及石龙子干燥药材粉末，分别加入稀释4倍的pH6.7的Tris-HCl缓冲液，置于预冷的研砵中研磨成匀浆状，冰浴超声30 min，0.8×10⁴ r·min^-1冷冻离心10min收集上清液后，再1.2×10⁴ r·min^-1冷冻离心10 min，收集上清液，与等体积40%蔗糖溶液混合，作为供试品溶液；

采用Native-PAGE电泳方法进行实验，根据获得的结果按公式：相对迁移率（R_f）=蛋白质迁移距离/指示剂迁移距离，计算出各谱带的R_f值，将所有谱带按R_f值由小到大依次编号并以共迁移谱带出现与否作为鉴别依据，分别获得蜥蜴和石龙子的特征谱带，蜥蜴的特征谱带为R_f值0.37；石龙子的特征谱带为R_f值0.30、0.64和0.77。

根据蜥蜴和石龙子不同的特征谱带区分蜥蜴及石龙子样品。

进一步地，根据电泳谱带的原始二态数据矩阵进行聚类分析，获得Native-PAGE电泳图谱聚类图；根据Native-PAGE电泳图谱聚类图得到的不同分类结果区分蜥蜴及石龙子样品。