[发明专利]抗龋齿咀嚼片及其制备方法在审
申请号: | 202010078930.4 | 申请日: | 2020-02-03 |
公开(公告)号: | CN111227090A | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
发明(设计)人: | 安敏;王宇;章真;王文 | 申请(专利权)人: | 珠海华敏医药科技有限公司 |
主分类号: | A23G3/36 | 分类号: | A23G3/36;A61K39/40;A61K9/20;A61P1/02;A61P31/04;C07K16/12;C07K16/02;C07K1/34;C07K1/30 |
代理公司: | 北京拉沃科创知识产权代理事务所(普通合伙) 11745 | 代理人: | 郜文刚 |
地址: | 519000 广东省深圳市高新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 龋齿 咀嚼 及其 制备 方法 | ||
1.抗龋齿咀嚼片,其特征在于,由下述重量份的原料制备而成:明胶粉100份、去离子水100份、甘油30份、还原糖3份、食用色素0.1份、抗龋齿卵黄抗体5-10份。
2.如权利要求1所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,包括步骤S1:制备抗龋齿卵黄抗体,其特征在于,还包括以下步骤:
S2、制备咀嚼糖果:将配方量的去离子水、明胶粉、甘油、还原糖、食用色素均匀混合后进行溶胶,得到溶胶混合物;再将制得的抗龋齿卵黄抗体灌注与溶胶混合物中,得到咀嚼糖果;
S3、制备咀嚼片:对步骤S2得到的咀嚼糖果进形压制成型、干燥吹洗后得到咀嚼片成品;
S4、检验、包装、入库。
3.如权利要求2所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,其特征在于,制备抗龋齿卵黄抗体步骤S1具体包括:
S1.1、制备抗原:取血清型为C型和D型的变形链球菌,分别以固体TYCSB琼脂斜面传代,在37℃厌氧条件下培养48小时,经PCR鉴定得到所述变形链球菌的纯种后,在液体TYCSB培养基中扩大培养48~72小时收集菌体,所述菌体用0.5%福尔马林25℃灭活24小时后,冻成干粉后作为抗原;
S1.2、制备抗体:
S1.2.1、佐剂的选用和产卵母鸡的免疫及取卵:初次免疫选用弗氏完全佐剂与所述抗原按照重量比1∶1混合乳化后作为初次免疫抗原,加强免疫均选用弗氏不完全佐剂与所述抗原按照重量比为1∶1混合乳化后作为加强免疫抗原;选用健康的白种来行母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射所述初次免疫抗原,此为初次免疫;隔2周后开始加强免疫,对初次免疫的母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射所述加强免疫抗原,以后每隔一周加强免疫一次,其初次免疫和加强免疫共三次,从初次免疫后算起,第三十天开始收集鸡卵,4℃条件下储存备用;
S1.2.2、卵黄抗体的提取:将鸡卵中的卵黄抗体提取,冷冻干燥,即得抗体。
4.如权利要求3所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,其特征在于,所述的卵黄抗体的提取采用水稀释法:从收集的免疫的鸡卵中分离得到蛋黄,用所述去离子水稀释,调节pH值在4.0-5.0范围内,在4℃条件下搅拌4小时,用离心机加工后弃去沉淀,将上清浓缩、冷冻干燥,即可。
5.如权利要求3所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,其特征在于,所述的卵黄抗体的提取采用PEG沉淀法:从收集的免疫的鸡卵中分离得到蛋黄,加入体积为所述蛋黄3倍体积的浓度为4%的PEG进行稀释,充分搅拌混匀后在温度为4℃、离心机转数为每分钟1300转条件下离心10分钟,取上清,然后向所述上清内逐滴滴加1/6所述上清体积的浓度为40%的PEG,充分搅拌混匀后在温度为4℃、离心机转数为每分钟1300转条件下离心10分钟,收集沉淀,冷冻干燥,即可。
6.如权利要求3所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,其特征在于,所述的卵黄抗体的提取采用膜过滤法:从收集的免疫的鸡卵中分离得到蛋黄,用所述去离子水稀释,在温度为4℃条件下静置12小时后,用分子量为200KD和150KD的膜分别过滤,收集150KD-200KD的蛋白物质,冷冻干燥,即可。
7.如权利要求3所述的抗龋齿咀嚼片的制备方法,其特征在于,所述的卵黄抗体的提取采用硫酸铵沉淀法:从收集的免疫的鸡卵中分离得到蛋黄,重复提取3次:第一次,取所述蛋黄等体积的生理盐水稀释并混合均匀后,缓慢滴加2倍蛋黄体积且浓度为50%的饱和硫酸铵,在温度为4℃条件下作用3小时,并在温度为4℃、离心机转数为每分钟1300转条件下离心10分钟,弃上清,留沉淀;第二次,用所述生理盐水溶解沉淀,然后加入2/3所述生理盐水体积且浓度为40%的饱和硫酸铵,在温度为4℃条件下作用3小时,并在温度为4℃、离心机转数为每分钟1300转条件下离心10分钟,弃上清,留沉淀;第三次,用所述生理盐水溶解沉淀,然后加入1/2所述生理盐水体积且浓度为33%的饱和硫酸铵,在温度为4℃条件作用3小时,将沉淀直接冷冻干燥,即可。
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