[发明专利]一种甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒和制备方法

说明书

本发明属于靶向药物研究领域，具体是涉及到一种甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒和制备方法，包括载体和连接在载体上的配体，所述载体为斑蝥素固体脂质纳米粒，所述配体为3‑琥珀酸‑30‑硬脂醇甘草次酸酯和/或叶酸‑聚乙二醇‑脑磷脂，本发明包封率高，载药量大，可以很好的发挥其药效。

技术领域

本发明属于靶向药物研究领域，具体是涉及到一种甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒和制备方法。

背景技术

斑蝥素(CTD)为无色无味发亮结晶，是斑蝥酸的内酐，其化学成分为单萜烯类，结构为外型-1,2-顺-二甲基-3,6-氧桥六氢化邻苯二甲酸酐。历史文献明确提示了斑蝥素在临床应用中强效的抗肝癌作用，同时在正常组织器官也会有较大的毒副作用，目前通常使用的是去甲斑蝥素(NCTD)，和CTD相比，NCTD克服了CTD刺激泌尿系统的副作用，在体外试验及临床治疗中显示较好的抗癌效果，因此，目前将其制成固体脂质纳米粒时，使用的是去甲斑蝥素。

为了提高去甲斑蝥素的靶向性，有文献报道将导向分子修饰斑蝥素，导向分子的种类较多，常见的有甘草次酸(GA)衍生物，甘草次酸是中药甘草根中甘草酸的主要水解物，已被广泛应用于肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)的治疗，甘草次酸(GA)衍生物通常以GA为骨架分子，通过一系列的反应合成一端为半乳糖苷、一端为硬质醇酯的两亲性的导向分子。另外，也有文献报告过将叶酸修饰去甲斑蝥素，得到叶酸修饰去甲斑蝥素隐形泡囊(CN201310205438.9一种叶酸修饰去甲斑蝥素隐形泡囊及其制备方法)。

通常来讲，在用导向分子修饰固体脂质纳米粒时，一般不使用多种导向分子修饰，一般采用单导向分子修饰的方式，其原因在于：固体脂质纳米粒空间有限，采用多种导向分子修饰时，导向分子过多，在固体脂质纳米粒表面会有空间位阻的竞争关系，故一般不采用两种及以上对其进行修饰。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒和制备方法，其包封率高，载药量大，可以很好的发挥其药效。

本发明的内容包括甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒，包括载体和连接在载体上的配体，所述载体为斑蝥素固体脂质纳米粒，所述配体为3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯和/或叶酸-聚乙二醇-脑磷脂。

本发明提供一种甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒的制备方法，包括如下步骤：

将单硬脂酸甘油酯、蛋黄卵磷脂、斑蝥素甲醇、配体和甲醇混合，配体为3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯和/或叶酸-聚乙二醇-脑磷脂，于55-75℃熔融使其充分混匀分散构成有机相，保温；取泊洛沙姆水溶液，控制温度为55-75℃，作为水相；将水相注入在搅拌作用下的有机相中，55-75℃恒温搅拌至无醇味，趁热粉碎，超声处理，冷却，过滤，得到甘草次酸和/或叶酸配基修饰的斑蝥素固体脂质纳米粒。

3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯的制备方法：称取甘草次酸十八醇酯4g、丁二酸酐7g以及对二甲氨基吡啶0.4g，置于圆底烧瓶中，加入重蒸吡啶50mL，在116℃条件下用磁力搅拌器(油浴)加热冷凝回流，在第8h和第10h，用GF254硅胶板监测(展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:3)，判断其反应程度。停止反应后，将反应液趁热加入适量水，滤过，得到棕褐色沉淀，沉淀再用三氯甲烷萃取2-3次，合并滤液，将其于水浴锅上蒸干，即得3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯的粗品，过硅胶柱(洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:3)，收集洗脱液，挥干溶剂，反复采用乙醚：丙酮(1:1)重结晶，收集3-琥珀酸-30-硬脂醇甘草次酸酯纯品。

叶酸-聚乙二醇-脑磷脂可以从上海芃硕生物科技有限公司购得。