[发明专利]一种氧化石墨烯磁珠、抗体偶联氧化石墨烯磁珠及其在细胞分选中的应用

权利要求书

1.一种应用于细胞分选的抗体偶联氧化石墨烯磁珠，其特征在于，在氧化石墨烯磁珠的石墨烯壳层偶联CD3抗体；

所述氧化石墨烯磁珠包括氮化铁磁珠核心和包覆在所述氮化铁磁珠核心表面的石墨烯壳层，所述石墨烯壳层经过插层氧化修饰；

所述氧化石墨烯磁珠的粒径为500nm～2μm；

所述氧化石墨烯的制备方法包括以下步骤：

1)将石墨烯包覆的氮化铁磁珠、硝酸钠、硫酸和高锰酸钾混合获得第一混合料液；

2)将所述第一混合料液超声分散后，与水混合获得第二混合料液；

3)将所述第二混合料液进行插层氧化获得氧化石墨烯磁珠；所述插层氧化的温度为80～90℃，所述插层氧化的时间为3～8min；

偶联CD3抗体的免疫磁珠的制备方法，包括以下步骤：

I)磁珠表面氧化石墨烯上的羧基活化，所述活化温度为15～25℃，所述活化时间为12～18min；

II)活化后的磁珠与CD3抗体偶联，所述偶联温度为15～25℃，所述偶联时间为2～4h；

步骤I)中羧基活化剂为EDC和NHS。

2.根据权利要求1所述的抗体偶联氧化石墨烯磁珠，其特征在于，步骤2)中所述超声分散的温度为30～40℃，所述超声分散的时间为25～35min。

3.根据权利要求1所述的抗体偶联氧化石墨烯磁珠，其特征在于，步骤3)中所述插层氧化后还包括离心、水洗和烘干步骤。

4.根据权利要求3所述的抗体偶联氧化石墨烯磁珠，其特征在于，所述离心的转速为7000～8000rpm，所述离心的时间为8～12min。

5.权利要求1～4任一项所述抗体偶联氧化石墨烯磁珠的制备方法，包括以下步骤：

I)磁珠表面氧化石墨烯上的羧基活化，所述活化温度为15～25℃，所述活化时间为12～18min；

II)活化后的磁珠与CD3抗体偶联，所述偶联温度为15～25℃，所述偶联时间为2～4h；

步骤I)中羧基活化剂为EDC和NHS。

6.权利要求1所述的抗体偶联氧化石墨烯磁珠在细胞分选中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，将所述抗体偶联氧化石墨烯磁珠与待分选的细胞混合后进行磁分离，收集磁珠、洗涤；所述抗体偶联氧化石墨烯磁珠对分选出的T细胞具有刺激增殖的作用。