[发明专利]绵羊IGF2BP1基因插入/缺失多态性的检测引物对、试剂盒、方法和应用有效
| 申请号： | 202010083871.X | 申请日： | 2020-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN111154891B | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 张清峰;潘传英;刘洪飞;白洋洋;林春建;佐建明;卢小芳;蓝贤勇 | 申请（专利权）人： | 天津奥群牧业有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 李晶 |
| 地址： | 301600 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绵羊 igf2bp1 基因 插入 缺失 多态性 检测 引物 试剂盒 方法 应用 | ||
1.绵羊IGF2BP1基因插入/缺失多态性的检测引物对在绵羊分子标记辅助选择育种方面中的应用；
所述引物对为：
上游引物：SEQNO.1；
下游引物：SEQNO.2；
所述检测引物对能够通过PCR扩增包含绵羊IGF2BP1基因内含子区插入/缺失多态性位点的片段；
所述插入/缺失多态性位点为绵羊IGF2BP1基因NC_019468.1:g.3705643937056440位5-bp插入/缺失多态性位点；
所述绵羊分子标记为绵羊产羔性状的分子遗传标记。
2.一种利用检测引物对检测绵羊IGF2BP1基因插入/缺失多态性的方法在绵羊分子标记辅助选择育种方面中的应用，其特征在于：所述检测方法的步骤如下：
以待测绵羊全基因组DNA为模板，以引物对为扩增引物，利用PCR扩增包含绵羊IGF2BP1基因下游区域插入/缺失多态性位点的片段，对PCR扩增产物进行电泳，根据电泳结果鉴定待测绵羊个体在所述插入/缺失多态性位点的基因型；
所述引物对为：
上游引物：SEQNO.1；
下游引物：SEQNO.2；
所述检测引物对能够通过PCR扩增包含绵羊IGF2BP1基因内含子区插入/缺失多态性位点的片段；
所述插入/缺失多态性位点为绵羊IGF2BP1基因NC_019468.1:g.3705643937056440位5-bp插入/缺失多态性位点；
所述绵羊分子标记为绵羊产羔性状的分子遗传标记。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述PCR采用的反应程序为：95℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸12s，14个循环，每循环后退火温度减1℃；50℃退火30s，72℃延伸12s，34个循环；72℃延伸10min。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述电泳时采用质量浓度为3.0％的琼脂糖凝胶。
5.根据权利要求2至4任一项所述的应用，其特征在于：根据电泳结果，所述插入/缺失多态性位点的插入/插入基因型II表现为107bp一条带纹，插入/缺失基因型ID表现为107bp和102bp两条带纹，缺失/缺失基因型DD表现为102bp一条带纹；
其中，所述插入/缺失多态性位点的插入/缺失ID基因型能够作为提高绵羊在第二胎产羔性状的DNA标记。
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