[发明专利]一种大西洋鲑三倍体连续批量诱导的方法

权利要求书

1.一种大西洋鲑三倍体连续批量诱导的方法，其特征在于：收集大西洋鲑精卵进行人工授精，将受精卵分成2-3组，依次连续对每组进行静水压诱导处理，抑制其第二极体排放，从而获得大西洋鲑三倍体；所述静水压诱导为，在受精后300-400度分，度分为温度℃×时间min，对第1组受精卵进行静水压处理，获得大西洋鲑三倍体；第1组受精卵诱导结束取出后，立即将第2组受精卵按照上述过程进行静水压诱导，如此可以连续诱导处理同批受精卵；

所述获得大西洋鲑三倍体在250度日发眼时，将发眼卵用70%乙醇在-20℃固定4h，剥掉卵膜、去除卵黄后，将胚体经蒸馏水冲洗后用流式细胞仪检测倍性；

具体为：

1）精卵采集及孵育

采集大西洋鲑精、卵，按精卵体积比1:100比例人工授精，受精后2-3 min，用清水多次洗卵，去除未受精卵和血块，分组，而后流水孵育；

2）静水压连续诱导

诱导加倍的处理时刻为受精后300-400度分，静水压处理在15 s内迅速加压到66-70MPa，处理时间为4-5 min；每组静水压处理后按1-2 MPa/s的速率缓慢降压至0 Mpa取出，之后加入同批的下一组受精卵，并重复上述过程，由此可以对同批受精卵进行静水压连续诱导处理，诱导后受精卵通过流水孵育获得大西洋鲑鱼苗；

所述步骤1）中人工授精、步骤2）诱导及孵育的水温均为7-10℃；

所述步骤2）中，静水压处理前1 min将受精卵装入有7-10℃清水的容器中，并放入加压腔内，到处理时刻时进行处理；每组受精卵处理结束缓慢降压时，将下一组受精卵装入有7-10℃清水的容器中，受精卵取出后，迅速将下一组受精卵放入加压腔内进行处理；在300-400度分时间范围内，按上述步骤静水压连续诱导处理同批次分组的受精卵。