[发明专利]细胞融合的光电传感器的制作方法及其成像系统的工作方法在审

专利信息
申请号: 202010085432.2 申请日: 2020-02-10
公开(公告)号: CN111263086A 公开(公告)日: 2020-06-09
发明(设计)人: 李恭新 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: H04N5/335 分类号: H04N5/335;C12N15/85;C12N15/31;C12N5/10;G01N33/487
代理公司: 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 代理人: 郭磊
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 细胞融合 光电 传感器 制作方法 及其 成像 系统 工作 方法
【权利要求书】:

1.一种细胞融合的光电传感器的制作方法,其特征在于,包括:将莱茵衣藻细胞眼点(Eye spot)处提取的视紫红质通道蛋白(ChR2)转染到人胚肾293(Hek293,Humanembryonic kidney)细胞内;观测ChR2质粒在细胞中的表达,并用膜片钳技术在光刺激进一步验证细胞表达结果;以表达了ChR2的Hek293细胞为光电传感器的敏感材料,其将器件吸收的光信号转换成离子电流,并以膜片钳技术为该光电传感器的信号采集和处理单元;将该细胞与膜片钳检测设备相结合构成细胞融合光电传感器。

2.如权利要求1所述的细胞融合的光电传感器的制作方法,其特征在于,该人胚肾293(Hek293,Human embryonic kidney)细胞具体构建过程是:1)使用带有聚合酶(pfu,Promega)的校对聚合酶(带有BamHI和HindIII限制性酶切位点的引物),通过PCR从全长cDNA模板(GenBank号:AF461397)获得全长chop2-315和C末端截短的chop2突变,并将其制成ChR2质粒;2)将Hek293细胞培养在9.6cm2的培养皿中,其中含有10%胎牛血清和1%双抗的高糖DMEM培养基,并将培养皿放置在37℃、含5%浓度的CO2的培养箱中,待细胞长满培养皿的1/2时备用;3)利用转染试剂(Lipofectamine 2000,Sigma)将ChR2质粒转染到Hek293细胞中,并放置在细胞培养箱中培养24小时;4)在培养皿中加入1uM的顺式视黄醛(all-trans retinal,Sigma),并在培养箱中孵育2小时。

3.如权利要求1所述的细胞融合的光电传感器的制作方法,其特征在于,通过荧光显微镜观测ChR2质粒在细胞中的表达。

4.一种基于细胞融合的光电传感器的成像系统的工作方法,其特征在于,光透过目标图像后,经过第一透镜汇聚到光空间调制器DMD上,通过随机二值图像控制DMD中相应的每一个微镜的翻转以控制反射到第二透镜上面的光强,并汇聚于权利要求1到3任一项制作方法制作的生物融合的光电传感器,同时用膜片钳检测细胞的光响应信号;最后,利用膜片钳检测的信号重构出原始图像。

5.如权利要求4所述的基于细胞融合的光电传感器的成像系统的工作方法,其特征在于,其中,成像系统的成像方法是基于压缩感知原理,以单个光电探测器实现高分辨率的成像;压缩感知原理可描述为:对于某未知信号x∈RN×1,在测量矩阵Φ∈RM×N(M<N)下的线性观测值为y∈RM×1,则有:

y=Φx; (1)

其中,信号x必需满足稀疏性条件,即x或x转换域内只有K(K<M)个元素为非零值;根据信号x的稀疏性,从满足式(1)的解中找出最稀疏的,当测量矩阵Φ满足限制性等距性质(Restricted Isometry Property,RIP:(1-δ)||x||22≤||Φx||22≤(1+δ)||x||22)时,这个“最稀疏”的解就是原始信号x;在该系统中,基于压缩感知原理通过DMD将图像的空间信号转换成时间系列信号,然后获得重构图像。

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